食管癌核基質與p16基因上游序列的相關性研究.pdf

1、核基質是由Berezney和Cofey于1974年首次提出的，它是核酸的骨架結構。是經核酸酶消化及高鹽抽提等處理依次去除細胞核脂質，可溶性組蛋白以及染色質后的獨立的殘余亞核結構，它作為細胞核的支架結構，在DNA的復制、轉錄、修復及RNA合成、剪切、運輸等方面起著重要作用。近年來的研究發(fā)現，組織細胞不同，核基質蛋白成分有一定的差別，與正常細胞相比，腫瘤細胞中亦有特異性核基質蛋白成分存在。核基質蛋白具有明顯的組織和細胞特異性。在研究腫瘤發(fā)病

2、機制及尋找腫瘤標記物方面，腫瘤相關的核基質的分離和確定已成為一種新的方法和途徑。迄今，已在肝癌，結腸癌，前列腺癌及乳腺癌等組織中分離確定了特異性的核基質。一些已應用于臨床的診斷和治療(例如:NMP22,NMP66)。食管癌的早期診斷的新型腫瘤標志物尚未發(fā)現。p16基因低表達見于包括食管癌在內的多種腫瘤組織中。p16基因只有與核基質結合，才能轉錄mRNA,進而表達p16蛋白起作用，而食管癌核基質與p16基因，尤其是與p16基因上游序列調控

3、區(qū)作用的相關性分析目前尚未報道。 目的：研究p16基因上游序列與食管癌組織核基質蛋白特異結合的相關性。旨在探討食管癌發(fā)病的機制。方法：應用質粒轉化，目的DNA片段回收，DNA探針的制備，SDS-PAGE技術和Southwestern雜交技術，對24例食管癌組織、癌旁組織(癌旁組織距癌灶>3．0cm)及正常組織的核基質蛋白進行研究。用UVPtool軟件進行定量分析。結果：SDS-PAGE顯示：與正常組織比較，食管癌組織28kD的核