食管癌基因譜與臨床病理及預(yù)后的相關(guān)性.pdf

1、第一部分食管鱗癌和正常食管黏膜組織中差異表達的基因篩選 目的：篩選出食管鱗癌和正常食管黏膜中差異表達的基因。方法：從6例食管癌及癌旁組織中提取RNA，反轉(zhuǎn)錄合成的cDNA為探針，與微點陣表達分析膜進行差異雜交。統(tǒng)計比較兩種組織中基因表達的差異。結(jié)果：自顯影結(jié)果顯示在所分析的488種已知基因中，Beta-catenin、wntl、smad4等56個基因在食管癌組織中表達上調(diào)，ATM等8個基因表達下調(diào)，參與細胞增殖、凋亡、分化和轉(zhuǎn)移

2、調(diào)控的多種基因的表達水平發(fā)生了明顯改變。結(jié)論：這些基因的表達改變組成了一個食管癌特異的基因表達譜，為食管癌細胞的惡性表型提供了分子遺傳學(xué)參考數(shù)據(jù)，一些與腫瘤發(fā)生相關(guān)的差異表達基因為發(fā)展生物標(biāo)記物或腫瘤早期診斷和治療提供了線索。 第二部分食管鱗癌和正常食管黏膜組織中差異表達的基因與食管癌的臨床病理以及預(yù)后的相關(guān)性研究 目的：采用實時定量PCR方法檢測食管癌樣本中細胞分化調(diào)控相關(guān)基因β-catenin、wntl、smad4、

3、hoxa9、bmi-1基因mRNA的表達量，并分析其與臨床資料之間的關(guān)系。方法：設(shè)計β-catenin、wnt1、smad4、hoxa9、bmi-1基因特異性探針和引物，建立β-catenin、wnt1、smad4、hoxa9、bmi-1基因?qū)崟r定量檢測方法；并檢測40例食管癌患者(男28例，女12例，38-82歲，中位年齡60歲)腫瘤切除石蠟標(biāo)本中β-catenin、wnt1、smad4、hoxa9、bmi-1基因mRNA的模板拷貝數(shù)

4、，以beta-actin為內(nèi)參得出校正過的基因表達相對值。統(tǒng)計學(xué)分析這些值與臨床病理及預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果：β-catenin、wnt1、smad4的mRNA表達水平與性別、年齡、病理亞型無關(guān)(P>0.05)；與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、細胞分化和病理分期有關(guān)(P<0.05)。hoxa9、bmi-1表達水平與性別、年齡、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及病理亞型無關(guān)(P>0.05)，與細胞分化和病理分期有關(guān)(P<0.05)。β-catenin高表達的患者預(yù)后較低表達者差(P