p21、p27基因多態(tài)性與食管癌的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、目的：食管癌是我國北方發(fā)病率較高的腫瘤。由于腫瘤確診時多處于中晚期，術(shù)后五年生存率很低，因此確定高危人群，實現(xiàn)早期診斷是提高其生存率的有效途徑。食管癌的發(fā)病與亞硝胺類化合物、營養(yǎng)缺乏、不良飲食習慣、吸煙、飲酒、霉菌感染等因素有關(guān)。然而，并非所有暴露這些環(huán)境危險因素的個體均患食管癌。這說明除環(huán)境因素外，一定的遺傳背景是這些腫瘤發(fā)生的重要因素。 P21和P27基因是近年來發(fā)現(xiàn)的細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑(cyclin-depend

2、entkinaseinhibitor,CDKI)家族中的重要成員。P21和P27基因具有抑制腫瘤細胞生長的作用，在許多腫瘤的發(fā)生發(fā)展中扮演著抑癌基因的角色。P21和P27基因的單核苷酸多態(tài)性(singlenucleotidepolymorphism，SNP)可能影響其基因的轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)的表達水平。因此，對P21和P27基因多態(tài)性與腫瘤發(fā)生、發(fā)展關(guān)系的研究將對腫瘤的預防和治療具有重要的指導意義。 本研究旨在探討P21基因外顯子的3

3、′非翻譯區(qū)(untranslatedregion，UTR)第20堿基對的SNP以及P27基因第109密碼子的SNP對食管鱗狀細胞癌發(fā)生及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的影響。 方法：采用基于醫(yī)院的病例-對照研究方法，收集202例食管癌患者和265例健康對照個體，采集靜脈抗凝血5ml，同時收集病史、個人史、腫瘤家族史。以蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細胞DNA，分別采用聚合酶鏈反應(polymerasechainreaction，PCR)

4、-片斷長度分析和PCR-限制性片段長度多態(tài)性(restrictionfragmentlengthpolymorphismanalysis，RFLP)方法檢測P21外顯子的3′UTR第20堿基對SNP以及P27基因第109密碼子SNP位點的基因型。 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用SPSS12.0版本軟件包(SPSSCompany,Chicago，Illinois，USA)進行，P＜0.05認為有統(tǒng)計學意義。比較基因型頻率的觀察值與預期值應用卡方

5、檢驗進行Hardy-Weinberg平衡檢驗。病例組與對照組的基因型分布比較采用行×列表卡方檢驗。以非條件Logistic回歸法計算經(jīng)年齡、性別校正的相對風險度比值比(oddsratio，OR)及其95％可信區(qū)間(confidenceinterval，CI) 結(jié)果：1ESCC患者組中上消化道腫瘤(uppergastrointestinalcancers，UGIC)家族史陽性者的比例(26.2％)顯著高于健康對照組(4.1％)(x

6、2=20.49，P=0.000)。ESCC組吸煙者比例(49.2％)與健康對照組(49.1％)相比無顯著性差異(x2=0.01，P=0.98)。 2P21和P27的基因型分布在ESCC患者組及健康對照組中均符合Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05)，在患者組和健康對照組中，P21基因3′UTR的T/T、C/T、C/C基因型頻率分別為18.8％、47.0％、34.2％和14.4％、49.4％、36.2％，P27基因第10

7、9密碼子的T/T、T/G、G/G基因型頻率分別為94.1％、5.9％、O％和94.0％、5，7％、0.3％，ESCC患者的P21基因3′UTR和P27基因第109密碼子的多態(tài)性基因型和等位基因型分布與健康對照組無顯著性差異(P＞0.05)。 3根據(jù)吸煙狀況分層分析發(fā)現(xiàn)，吸煙患者P21的T/T基因型頻率(26.0％)顯著高于健康吸煙組(12.0％)(x2=8.60，P=0.014)。與C/C基因型相比，攜帶T/T基因型可顯著增加吸

8、煙者的ESCC發(fā)病風險(經(jīng)性別和年齡校正的OR值為3.36，95％CI=1.45-7.75)。而在非吸煙的患者和健康個體中，P21的基因型及等位基因型頻率均無顯著性差異(P＞0.05)。P27的基因型及等位基因型頻率在吸煙及非吸煙的患者和健康個體中均無顯著性差異(P＞0.05)。4根據(jù)有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移進行分層分析表明，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的P21的T/T基因型頻率(26.4％)顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(15.3％)(x2=6.128，P=0.01

9、3)。因此，與常見基因型C/C相比，攜帶T/T基因型可明顯增加ESCC患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風險，經(jīng)性別、年齡校正的OR值分別為3.11(95％CI=1.28-7.52)。而P27基因多態(tài)性在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組之間無顯著性差異(P＞0.05)，所以P27基因多態(tài)性與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的風險性無關(guān)。 結(jié)論：1上消化道腫瘤家族史明顯增加ESCC的發(fā)病風險。 2P21基因3′UTR和P27基因第109密碼子的多態(tài)性基因型和等位基