鋁佐劑的性質(zhì)研究及其在重組疫苗配制中的應(yīng)用.pdf

1、佐劑是指先于抗原或與抗原混合同時(shí)注入動(dòng)物體內(nèi)，能夠改變或增強(qiáng)機(jī)體對(duì)該抗原的免疫應(yīng)答，發(fā)揮輔助作用的一類(lèi)物質(zhì)。疫苗中加入佐劑可以為機(jī)體提供更加長(zhǎng)久的免疫保護(hù)。自1926年Glenny等發(fā)現(xiàn)鋁鹽復(fù)合物吸附沉淀的白喉毒素(DT)懸液要比類(lèi)毒素本身具有更好的免疫原性起，鋁鹽復(fù)合物作為疫苗佐劑已有80多年的歷史了。鋁佐劑作為第一個(gè)被美國(guó)食品藥品監(jiān)督局FDA批準(zhǔn)的人用佐劑，仍然是世界上公認(rèn)最安全，應(yīng)用最廣泛的佐劑。
　　本研究嘗試配制不同類(lèi)型

2、的磷酸鹽緩沖液和鋁鹽溶液，設(shè)定不同的溫度，利用蠕動(dòng)泵將兩類(lèi)溶液在不同的混合器中混合，使用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH，配制出若干批次具有不同理化性質(zhì)的鋁佐劑;測(cè)定它們的pH，粒徑大小和PZC等各項(xiàng)理化參數(shù)，篩選出四種顆粒較小的鋁佐劑，編號(hào)25～28，研究表明其顆粒大小可在10～20μm左右，PZC介于氫氧化鋁和磷酸鋁佐劑之間;考察了高溫高壓滅菌對(duì)其理化性質(zhì)的影響，結(jié)果表明除25號(hào)佐劑外，其他三種佐劑的pH和粒徑等性質(zhì)在滅菌后沒(méi)有發(fā)生明顯變化。

3、>　　本研究將四種鋁佐劑分別與本實(shí)驗(yàn)室純化的HPV16L1、18L1和HEV239病毒樣顆?；旌虾笈渲瞥鯤PV16、18和HEV疫苗?？乖铰蕼y(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明各種鋁佐劑對(duì)不同病毒樣顆粒的吸附率為60％-80％左右，部分組合可達(dá)90％;解離實(shí)驗(yàn)表明病毒樣顆粒在解離液作用下的大部分解吸附比率大約為70％上下。考察不同溫度下三類(lèi)疫苗蛋白的活性，發(fā)現(xiàn)26和27號(hào)佐劑配制的疫苗蛋白活性?xún)?yōu)于25和28號(hào)佐劑。DSC差示掃描熱量分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明4種

4、HPV16疫苗Tm略顯差異，約70℃左右;4種HPV18疫苗Tm值接近，集中在78℃;4種HEV疫苗Tm值差異性較大，HEV25、26約75℃，HEV27、28約60℃，表明鋁佐劑會(huì)影響病毒樣顆粒的穩(wěn)定性。研究顯示HPV16/18臨床用苗和完成Ⅲ期臨床的HEV疫苗益可寧Hecolin(R)的pH，粒徑大小和PZC等各項(xiàng)理化參數(shù)與自行配制的疫苗相當(dāng)。自行配制的HPV16/18疫苗免疫原性略高于臨床用苗，配制的HEV疫苗也與即將商業(yè)化的HE