2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、沙眼衣原體(Chlamydia trachomatis,C.t)是目前國內(nèi)外引起性傳播疾病最常見的病原體。C,t D~K 型引發(fā)的泌尿生殖道感染在臨床上有不同的表現(xiàn)形式:有的有自覺癥狀、有的癥狀隱匿:有的可以很快治愈,有的則遷延反復,還有的可導致前列腺炎、不孕不育、異位妊娠、慢性盆腔炎等多種嚴重并發(fā)癥。C.t其他血清型可引起沙眼和性病性淋巴肉芽腫。預防和控制C.t感染已成為重要的公共衛(wèi)生問題。 衣原體多形外膜蛋白(polymor

2、phic membrane proteins,Pmp)是近年來新發(fā)現(xiàn)的位于衣原體外膜上的一個獨特的蛋白家族,推測它們可能具有黏附、分子轉(zhuǎn)運、信號傳導等細胞壁相關功能,并與衣原體的免疫逃逸和組織嗜性有關。已成為當今衣原體研究方面的熱點之一。目前國外的一些研究機構正在開展Pmp蛋白與C.t泌尿生殖道感染的相關性研究。 目的:克隆、表達、純化沙眼衣原體E型Bour菌株Pmp蛋白,并鑒定其免疫原性。檢測沙眼衣原體泌尿生殖道感染患者血清中

3、的Pmp蛋白的抗體。初步探討Pmp蛋白與沙眼衣原體泌尿生殖道感染的相關性。 方法:C.t E型Bour菌株經(jīng)細胞培養(yǎng)后提取染色體DNA作為模板,設計引物擴增出pmpG基因的N端片段(PmpG-N),并將PmpG-N定向克隆到原核表達載體PET30a(+)中構建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化到E.coli DH5 α中表達重組質(zhì)粒經(jīng)過鑒定的重組質(zhì)粒再轉(zhuǎn)化至E.coli BL21 中,在IPTG誘導下表達PmpG-N。通過His標簽的鎳離子交換層析

4、柱純化 PmpG-N,并用 Western-blot 方法鑒定其免疫原性。從臨床采集77例C.t泌尿生殖道感染患者和20例正常人的血清,采用Western-blot方法檢測血清中的Pmp蛋白抗體,分組比較Pmp蛋白抗體的陽性率,并同臨床資料進行相關性分析。 結果: (1)C.t E型BotJr菌株PmpG-N克隆成功,在 E.coli BL21 中得到表達。 (2)純化的PmpG-N,能夠與PmpG特異性抗體結合

5、,證實其具有免疫原性。 (3)Pmps-Ab陽性率在C.t感染組為90.20%,陰性對照組為20%,感染組明顯高于陰性對照組(p<0.05)。 (4)C.t感染組9種Pmp-Ab都可在病人血清中檢測到,但不同抗體的陽性率不同,PmpA~Pmpl分別為61.04%、88.31%、63.63%、28.57%、63.63%、75.32%、62.34%、77.92%和70.13%;其中PmpB-Ab陽性率最高88.31%,Pmp

6、D-Ab陽性率最低28.57%,明顯低于PmpB-Ab(p(0.05)。 (5)持續(xù)感染組與轉(zhuǎn)陰組9種Pmp-Ab陽性率均無顯著性差別。 (6)PmpD-Ab陽性率在女性患者為50%,男性患者為22.07%,女性明顯高于男性(p<0.05);兩組其他8種 Pmp-Ab 陽性率無顯著性差別(p>0.05)。 (7)青年組9種Pmps-Ab陽性率均明顯高于中老年組(p<0.05)。 結論: (1)C.

7、t E型Botur菌株PmpG-N 成功克隆表達,且具有免疫原性,為今后Pmp蛋白的基礎和臨床研究奠定了基礎。 (2)沙眼衣原體Pmp蛋白具有免疫原性,C.t泌尿生殖道感染的病人可產(chǎn)生針對Pmp蛋白的抗體。 (3)不同的Pmp蛋白免疫原性有差別,推測PmpB免疫原性較強,PmpD免疫原性較弱。 (4)Pmp蛋白抗體對機體的免疫保護作用不強。 (5)Pmp蛋白的血清抗體存在個體差異和地區(qū)差異。 (6

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