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文檔簡介
1、肺纖維化(pulmonary fibrosis)是多種彌漫性間質(zhì)性肺疾病的共同結(jié)局,主要是以膠原為主的ECM代謝失衡而過度沉積所致。目前以糖皮質(zhì)激素和免疫抑制劑為主的治療方法并不能改善肺纖維化的預(yù)后,導(dǎo)致其死亡率逐漸上升,因此迫切需要研究治療肺纖維化的新方法。大量證據(jù)表明,在肺纖維化的發(fā)生發(fā)展中TGF-β<,1>及其信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路分子Smad4起著非常關(guān)鍵的作用。通過阻斷TGF-β的作用來治療纖維化疾病,已成為人們最近研究的熱點。阿魏酸鈉
2、(sodium ferulate)是中藥川芎、當(dāng)歸等的主要成分阿魏酸的鈉鹽,具有拮抗ET-1、抑制血小板聚集、疏通微循環(huán)、抑制炎癥反應(yīng)、抗氧化等作用。本研究以博萊霉素誘導(dǎo)的大鼠肺纖維化為模型,通過觀察阿魏酸鈉對大鼠肺纖維化膠原代謝及TGF-β<,1>/Smad4信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響,探討其防治肺纖維化的作用和機制,從而為進(jìn)一步在中藥中研究有效的抗肺纖維化藥物提供理論依據(jù)。 第一部分阿魏酸鈉對肺纖維化大鼠肺組織膠原代謝失衡的調(diào)控作用
3、 目的:觀察阿魏酸鈉對博萊霉素所致肺纖維化大鼠膠原代謝失衡的調(diào)控作用。 方法:將30只SD大鼠隨機分為對照組,肺纖維化組和阿魏酸鈉組,每組10只。肺纖維化組和阿魏酸鈉組以氣管內(nèi)滴入博萊霉素(5mg/kg體重)建立肺纖維化動物模型,阿魏酸鈉組采用阿魏酸鈉(150mg/kg體重)灌胃治療。HE染色檢測肺組織病理改變并進(jìn)行細(xì)胞核計數(shù);膠原纖維染色檢測總膠原纖維表達(dá);免疫組化檢測Ⅰ型膠原纖維。 結(jié)果:與對照組比較,肺纖維
4、化模型組肺組織內(nèi)細(xì)胞數(shù)(22243.60±5011.55比11496.89±5598.97,P<0.001)、肺內(nèi)總膠原纖維(0.96±0.37比0.23±0.15,P<0.001)、Ⅰ型膠原纖維(0.97±0.34比0.27±0.08,P<0.001)均顯著增高。阿魏酸鈉組與肺纖維化組比較,肺組織內(nèi)細(xì)胞數(shù)(14992.04±5593.80比22243.60±5011.55,P<0.01)、肺內(nèi)總膠原纖維(0.33±0.21比0.96±
5、0.37,P<0.001)、Ⅰ型膠原纖維(0.39±0.25比0.97±0.34,P<0.001)均顯著降低。 結(jié)論:阿魏酸鈉能有效地減輕肺纖維化大鼠肺組織的炎癥和纖維化程度,表明阿魏酸鈉具有一定的抗肺纖維化作用。 第二部分阿魏酸鈉對肺纖維化大鼠肺組織TGF-β1/Smad4信號通路分子mRNA表達(dá)的影響 目的:觀察阿魏酸鈉對肺纖維化大鼠肺組織TGF-β<,1>信號通路分子mRNA表達(dá)的影響,探討其防治肺纖維化的
6、機制。 方法:將30只SD大鼠隨機對照組,肺纖維化組和阿魏酸鈉組,每組10只。以氣管內(nèi)滴入博萊霉素(5mg/kg體重)建立肺纖維化動物模型,阿魏酸鈉組采用阿魏酸鈉(150mg/kg體重)灌胃處理。HE染色檢測肺組織病理改變;原位雜交技術(shù)檢測肺組織TGFβRⅡ及Smad4 mRNA表達(dá);實時熒光定量RT-PCR技術(shù)檢測TGF-β<,1>mRNA表達(dá)。 結(jié)果:HE切片顯示對照組肺組織結(jié)構(gòu)正常,肺泡內(nèi)未見炎性細(xì)胞。模型組肺泡內(nèi)
7、見大量炎性細(xì)胞,重度纖維組織增生。阿魏酸鈉組細(xì)胞浸潤較輕,纖維化改變不明顯。與對照組比較,模型組大鼠肺內(nèi)TGF-β<,1>mRNA(0.0170±0.0157對0.0025±0.0030,P<0.01)、TGFβRⅡ mRNA(0.18±0.08對0.07±0.04,P<0.01)和Smad4 mRNA(0.17±0.10對0.07±0.03,P<0.01)的表達(dá)均顯著增高。阿魏酸鈉組肺內(nèi)TGF-β<,1>mRNA(0.0058±0.0
8、094對0.0170±0.0157,P<0.05)、TGFβRⅡmRNA(0.13±0.04對0.18±0.08,P<0.05)和Smad4 mRNA(0.11±0.03對0.17±0.10,P<0.05)的表達(dá)低于模型組。 結(jié)論:阿魏酸鈉能有效地抑制TGF-β<,1> mRNA、TGFβ RⅡ mRNA和Smad4 mRNA表達(dá)的上調(diào),從而具有抗肺纖維化的作用。 總結(jié): 1.阿魏酸鈉具有抗大鼠肺纖維化的作用;
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