甘利欣對(duì)大鼠肺纖維化的治療作用及機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的： 1.建立大鼠肺纖維化動(dòng)物模型，探討甘利欣(18a-甘草酸二銨)對(duì)博萊霉素所致的大鼠肺纖維化的治療作用及機(jī)制；2.對(duì)比甘利欣低劑量、中劑量、高劑量治療效果，探討出的最佳治療劑量。 方法： 將SD級(jí)雄性大鼠60只，體重180g±20g，隨機(jī)分成6組：博萊霉素所致大鼠肺纖維化模型組、生理鹽水對(duì)照組、甘利欣低劑量(25mg/kg)、中劑量(50mg/kg)、高劑量(100mg/kg)、地塞米松(Dexametha

2、sone，DXM)治療組，每組10只。博萊霉素致肺纖維化動(dòng)物模型第28天開(kāi)始，各治療組在每天同一時(shí)間段內(nèi)連續(xù)14天腹腔內(nèi)注射。治療的劑量分別為地塞米松注射液3mg·kg-1·d-1(濃度為5mg/ml)、甘利欣低劑量25mg·kg-1·d-1、中劑量50 mg·kg-1·d-1、高劑量100 mg·kg-1·d-1劑量；在治療后第15天取大鼠左肺下葉1cm×1cm×1cm大小的組織，固定于10％甲醛溶液，供免疫組化FGF-β1、IFN-

3、γ表達(dá)觀察；同樣取大鼠右肺下葉供HE染色病理觀察。抽取大鼠6-8ml血液靜置30分鐘后中速離心15分鐘，取其血清用ELISA雙抗體夾心法測(cè)定各組大鼠血清白細(xì)胞介素4(IL-4)、IFN-γ含量。 結(jié)果： 1.采用分級(jí)方法定性評(píng)價(jià)HE染色大鼠肺組織的肺纖維化程度，發(fā)現(xiàn)甘利欣各治療組、DXM治療組大鼠肺纖維化程度均較輕微。2.BLM組大鼠肺組織TGF-β1染色呈強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，成纖維細(xì)胞、肌纖維母細(xì)胞等間質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)增強(qiáng)。提示

4、TGF-β1參與了肺纖維化和組織修復(fù)反應(yīng)，并對(duì)于細(xì)胞外基質(zhì)持續(xù)過(guò)量沉積具重要作用。甘利欣各治療組、DXM治療組陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞較少；免疫組化TGF-β1定量分析結(jié)果顯示：與模型組相比，對(duì)照組、地塞米松組、低劑量組、中劑量組、高劑量組的p值分別為0.001、0.000、0.000、0.010、0.001，有顯著差異，模型組肺組織中TGF-β1表達(dá)強(qiáng)烈；低劑量組均數(shù)與中劑量組、高劑量組均數(shù)相比，p值分別為0.448、1.000，中劑量組與高劑量

5、組均數(shù)相比，p=0.997，即甘利欣各治療組之間對(duì)大鼠肺組織TGF-β1的影響無(wú)差異。3.甘利欣各治療組、DXM治療組巨噬細(xì)胞等炎性細(xì)胞IFN-γ強(qiáng)陽(yáng)性反應(yīng)，成纖維細(xì)胞、肌纖維母細(xì)胞等間質(zhì)細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)減弱，免疫組化IFN-γ各組數(shù)據(jù)顯示，低劑量組與對(duì)照組、模型組、中劑量組均數(shù)相比均數(shù)相比，p值分別為0.007、0.014、0.004，即甘利欣低劑量組對(duì)IFN-γ的影響效果與對(duì)照組、模型組、中劑量組相比有顯著的差異，而與高劑量組均數(shù)相比，

6、p=0.138無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.模型組大鼠血清IL-4含量較高，而IFN-γ含量較低，甘利欣各治療組、DXM治療組大鼠血清IL-4含量較低，而IFN-γ含量較高。甘利欣低、中、高劑量組三組大鼠血清IL-4與模型組比較存在差異(P<0.05)，而甘利欣各組兩兩比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。大鼠血清IFN-γ各組均數(shù)方差分析F=8.337，p=0.000，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，各組的總體均數(shù)有明顯差異；模型組與對(duì)照組、地塞米松組、甘利欣低劑量組、

7、中劑量組、高劑量組相比，p值分別為0.003、0.001、0.000、0.000、0.000，存在非常顯著差異，而地塞米松組、苷利欣低劑量組、中劑量組、高劑量組兩兩相比無(wú)差異(P>0.05)。 結(jié)論： 甘利欣各治療組大鼠普通病理顯示肺損傷較輕微，肺組織內(nèi)TGF陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞陽(yáng)性染色顯著少于BLM組，而肺組織內(nèi)IFN-γ陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞陽(yáng)性染色顯著多于BLM組；各指標(biāo)與DXM組比較無(wú)顯著差異。說(shuō)明甘利欣具有較強(qiáng)的抗肺纖維化作用，