人工合成E-選擇素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷腦組織血管細(xì)胞粘附分子-1及其mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分：改良的大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型的建立及人工合成E-選擇素對(duì)腦梗死體積的影響
　　 背景及目的：ZeaLonga等應(yīng)用線(xiàn)栓阻塞大腦前動(dòng)脈、頸總動(dòng)脈及后交通動(dòng)脈的血流，使大腦中動(dòng)脈閉塞，拔除線(xiàn)栓后可恢復(fù)腦組織血流灌注，形成局灶性腦缺血再灌注損傷模型。本實(shí)驗(yàn)擬通過(guò)對(duì)傳統(tǒng)ZeaLonga法進(jìn)行部分改進(jìn)，建立一種模型成功率更高，穩(wěn)定性更好的模型。應(yīng)用人工合成E-選擇素干預(yù)大鼠，研究其對(duì)腦梗死體積的影響。
　　 方法

2、：90只雄性Sprague-Dawley大鼠(SD大鼠)被隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組和人工合成E-選擇素治療組。參照Z(yǔ)eaLonga法，采用頸部旁正中切口，術(shù)中不結(jié)扎翼腭動(dòng)脈，從頸總動(dòng)脈切口進(jìn)線(xiàn)等改進(jìn)，制作SD大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型。通過(guò)神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分和2,3,5—氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazoliumchloride，TTC)染色結(jié)果，來(lái)觀(guān)察模型的可靠性和穩(wěn)定性，并應(yīng)用相關(guān)軟件和公式計(jì)算腦梗死體積

3、。
　　 結(jié)果：模型成功大鼠神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分為1-3分，缺血區(qū)腦組織經(jīng)TTC染色后呈蒼白色，改良后模型成功率為80％。治療組大鼠腦梗死體積為233±15mm3，較模型組287±19mm3減少(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：改良后的模型具有制作簡(jiǎn)便，穩(wěn)定性好，模型成功率高的優(yōu)點(diǎn)，是一種用于研究局灶性腦缺血再灌注損傷理想的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。人工合成E-選擇素能夠減少腦梗死體積，具有腦保護(hù)作用。
　　 第二部分：人工合成E-

4、選擇素對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后血管細(xì)胞粘附分子-1蛋白和mRNA表達(dá)的影響
　　 目的：探討人工合成E-選擇素在對(duì)大鼠局部腦缺血再灌注損傷中腦組織血管細(xì)胞粘附分子-1及其mRNA表達(dá)的影響及其作用機(jī)制。
　　 方法：42只雄性SD大鼠被隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組和人工合成E-選擇素治療組。采用改良的ZeaLonga法建立腦缺血再灌注損傷模型，治療組大鼠用人工合成E-選擇素10mg/Kg股靜脈注射體內(nèi)。免疫組化法觀(guān)察缺

5、血區(qū)腦組織中微血管的血管細(xì)胞粘附分子-1(vascularcelladhesionmolecule-1，VCAM-1)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)，RT-PCR法觀(guān)察其mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果：1．假手術(shù)組：VCAM-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)少，VCAM-1mRNA表達(dá)低。2．模型組：VCAM-1陽(yáng)性細(xì)胞在再灌注2h后開(kāi)始出現(xiàn)，并持續(xù)增多，在24h后達(dá)高峰，72h開(kāi)始下降，各時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組比較明顯增多(P＜0.01);VCAM-1mRNA在再灌注2h后開(kāi)

6、始表達(dá)，12h后達(dá)到高峰，24h開(kāi)始降低，各時(shí)間點(diǎn)與假手術(shù)組比較明顯增高(P＜0.01)。3．治療組：VCAM-1陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較假手術(shù)組多(P＜0.05)，但較模型組少(P＜0.05);VCAM-1mRNA表達(dá)較假手術(shù)組高(P＜0.05)，但較模型組低(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1.大鼠形成局灶性腦缺血再灌注損傷后，缺血區(qū)腦組織中炎性細(xì)胞因子積聚，促使血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的粘附分子表達(dá)上調(diào)，表現(xiàn)為VCAM-1mRNA及VCAM-1