缺氧誘導(dǎo)因子在胃癌細(xì)胞能量代謝實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討缺氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）基因沉默對(duì)SGC-7901人胃癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響。
　　方法：
　　1.實(shí)驗(yàn)利用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染介導(dǎo)的siRNA干擾技術(shù)，將干擾序列轉(zhuǎn)染人胃癌SGC-7901細(xì)胞，設(shè)立干擾組、陰性對(duì)照組、空載體組及空白對(duì)照組。
　　2.用RT-PCR及Western Blot檢測(cè)各組HIF-1αmRNA及蛋白的表達(dá)，
　　3.MTT比色法觀察 HIF-1α基因沉默后 SGC-7901細(xì)

2、胞增殖情況，流式細(xì)胞儀(FCM)檢測(cè)HIF-1α基因沉默后SGC-7901人胃癌細(xì)胞凋亡的影響。
　　結(jié)果：缺氧實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:缺氧不同時(shí)相HIF-lamRNA表達(dá)無明顯變化(P>0.05),但隨缺氧時(shí)間延長(zhǎng),HIF-la蛋白表達(dá)顯著增加(P<0.01)。干擾組在各時(shí)間點(diǎn)對(duì)HIF-1αmRNA表達(dá)的沉默效率均在80％以上，明顯高于其他3組(P均＜0.05)；此外，與其他三組相比，干擾組HIF-1α蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯降低(P＜0.05

3、)，增殖曲線表明其增殖明顯受抑；凋亡率顯著升高(P＜0.01)。
　　結(jié)論：HIF-1α基因在人胃癌組織中高表達(dá)，與胃癌的分化、臨床分期、分級(jí)、侵襲轉(zhuǎn)移因素相關(guān)，說明HIF-1α的信號(hào)通路在胃癌的發(fā)生、發(fā)展和侵襲、轉(zhuǎn)移中有重要作用，可以作為胃癌內(nèi)缺氧的標(biāo)志物和胃癌診斷和判斷預(yù)后的基因篩選指標(biāo)，有利于改善既往的治療策略，給腫瘤病人更合理和個(gè)性化的治療。 RNA干擾成功地干涉了HIF-1α調(diào)控的糖酵解通路，抑制胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)和能量代謝，