缺氧誘導因子-1α在皮膚鱗狀細胞癌中的表達及促進細胞增殖作用.pdf

1、目的：研究缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在鱗狀細胞癌細胞中的表達情況，及基因干擾HIF-1α后對鱗狀細胞癌細胞的影響。
　　 方法：應用逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR)、蛋白免疫印記（Western Blot）技術比較鱗狀細胞癌細胞系（A431細胞）和永生化角質(zhì)細胞系（hacat細胞）mRNA和蛋白水平表達；及基因敲除HIF-1α基因后HIF-1α、VEGF mRNA和蛋白表達情況；應用流式細胞儀技

2、術和CCK8細胞增殖檢測法檢測基因敲除HIF-1α基因后A431細胞凋亡和增殖情況。
　　 結(jié)果：RT-PCR技術檢測A431細胞與hacat細胞相比HIF-1α、VEGF mRNA表達增加（P＜0.05），敲除HIF-1α基因的A431細胞與未敲除HIF-1α基因的A431細胞相比HIF-1α、VEGF mRNA表達降低（P＜0.05）；Western Blot技術檢測A431細胞與hacat細胞相比蛋白表達增加（P＜0.05

3、），敲除HIF-1α基因的A431細胞與未敲除HIF-1α基因的A431細胞相比HIF-1α、VEGF蛋白表達降低（P＜0.05）；流式細胞儀技術檢測敲除HIF-1α基因的A431細胞與未敲除HIF-1α基因的A431細胞相比，凋亡細胞數(shù)增加、凋亡細胞比例增高且差異性有意義（P＜0.05）；CCK8細胞增殖檢測法檢測敲除HIF-1α基因的A431細胞與未敲除HIF-1α基因的A431細胞相比，細胞增殖速度慢，存在差異性表達（P＜0.05