路氏滋燥湯對干燥綜合征小鼠免疫病理的影響.pdf

1、一目的:
　　 從路氏滋燥湯對誘導(dǎo)型干燥綜合征(Sj(O)gren's syndrome,SS)小鼠免疫學(xué)、病理學(xué)影響的角度,探討干燥綜合征發(fā)病機(jī)理及路氏滋燥湯治療干燥綜合征的作用機(jī)制。
　　 二方法:
　　 選用C57小鼠為實(shí)驗(yàn)對象,用同種異體小鼠的頜下腺制備抗原,加CFA(完全弗氏佐劑),加白百破疫苗給動(dòng)物多點(diǎn)注射,誘導(dǎo)SS(干燥綜合征)動(dòng)物模型。造模第二天開始給治療組小鼠以路氏滋燥湯治療,每天一次,空白組和

2、模型組給予等量蒸餾水灌胃。兩周后處死動(dòng)物,測量各組小鼠的體重,最后一周的飲水量；用流式細(xì)胞儀檢測各組小鼠頜下腺細(xì)胞凋亡率,用免疫組化法測各組小鼠頜下腺白細(xì)胞介素-10(interleuldn-10,IL-10)、干擾素-r(interferon-r,IFN-r)、Fas及Fasl的含量；同時(shí)光鏡下觀察各組動(dòng)物頜下腺的病理變化。
　　 三結(jié)果:
　　 (一)處死前動(dòng)物體重測量結(jié)果:空白組體重和其他三組有明顯差異(P<0.0

3、5),而其他三組之間無顯著差異?？梢奡S小鼠由于唾液分泌減少,直接影響到其進(jìn)食量。
　　 (二)處死前一周動(dòng)物飲水量測量結(jié)果:結(jié)果顯示各組之間無顯著性差異,提示早期淋巴細(xì)胞浸潤狀況與飲水量之間無直接相關(guān)關(guān)系。
　　 (三)動(dòng)物頜下腺細(xì)胞凋亡率檢測結(jié)果:空白組和其他三組有非常顯著的差異(P<0.01),模型組和兩個(gè)治療組也有顯著差異(P<0.05),兩個(gè)治療組之間無顯著差異?？梢娫炷?dòng)物出現(xiàn)了明顯的SS體征,而路氏滋燥湯可

4、有效降低頜下腺細(xì)胞的凋亡率。
　　 (四)頜下腺IL-10、IFN—γ檢測結(jié)果顯示:模型組小鼠頜下腺中IFN-γ表達(dá)水平與正常組相比有顯著增高,而IL-10水平非常低。因此我們認(rèn)為,在我們所建立的SS模型小鼠頜下腺中浸潤的淋巴細(xì)胞主要是識別自身頜下腺組織的Th1細(xì)胞,Th1細(xì)胞分泌IFN-γ等細(xì)胞因子,這些細(xì)胞因子又發(fā)揮正反饋的作用,進(jìn)一步刺激Th細(xì)胞增殖并向Th1細(xì)胞分化,Th1細(xì)胞發(fā)揮輔助作用,促使CTL細(xì)胞增殖并特異識別殺

5、傷頜下腺組織細(xì)胞,從而導(dǎo)致模型小鼠頜下腺中浸潤淋巴細(xì)胞增多,病變逐漸加重。IFN-γ同時(shí)抑制了Th2分泌IL-10。
　　 (五)SS小鼠頜下腺凋亡相關(guān)基因Fas和Fasl免疫組化分析:結(jié)果顯示模型組Fas和Fasl高度表達(dá),可見腺泡及導(dǎo)管上皮細(xì)胞的凋亡可能是導(dǎo)致分泌功能損傷的機(jī)制。治療組比模型組凋亡因子表達(dá)降低,可見路氏滋燥湯可有效降低細(xì)胞凋亡基因的表達(dá)。
　　 (六)鏡下觀察小鼠頜下腺病理變化:C57品系小鼠模型組,

6、給藥組均出現(xiàn)不同程度的腺體問淋巴細(xì)胞浸潤,較大灶性淋巴細(xì)胞浸潤中可見生發(fā)中心,淋巴細(xì)胞浸潤灶內(nèi)常見漿細(xì)胞,而間質(zhì)中極少；導(dǎo)管上皮過度增生,管腔擴(kuò)張或完全閉鎖,形成所謂的肌上皮島。部分血管擴(kuò)張；大量腺實(shí)質(zhì)破壞。(見彩圖)
　　 四結(jié)論
　　 路氏滋燥湯對SS小鼠頜下腺的免疫病理損傷有明顯的抑制作用。其作用可能是通過調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞的比例以及頜下腺細(xì)胞凋亡相關(guān)因子和基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)的。其具體途徑是,一方面降低Th1細(xì)胞分泌IFN