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1、目的:研究人參皂甙單體Rg1(Ginsenoside Rg1)在定向誘導(dǎo)分化小鼠D3系胚胎干細(xì)胞(D3 embryonic stem cells,D3-ESCs)為心肌樣細(xì)胞中的作用,以及人參皂甙單體Rg1對(duì)D3-ESCs遷移所起的作用。 方法:D3-ESCs在基本的細(xì)胞培養(yǎng)基中培養(yǎng),在人參皂甙單體Rg1的定向誘導(dǎo)下,分化為心肌樣細(xì)胞。用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài);用免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)檢測(cè)特異的α-肌節(jié)型肌動(dòng)蛋白(α-sarcome
2、ric actin);用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)檢測(cè)α-心肌肌球蛋白重鏈的表達(dá)(α myosin heavy chain,α-MHC);用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)胚胎干細(xì)胞的分化率;用遷移濾膜檢測(cè)胚胎干細(xì)胞的遷移率。 結(jié)果:被人參皂甙單體Rg1誘導(dǎo)后,大多數(shù)的D3-ESCs能分化為心肌樣細(xì)胞,這些細(xì)胞中的α-肌節(jié)型肌動(dòng)蛋白(α-sarcomeric actin)染色呈陽(yáng)性,通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄PCR 可以檢測(cè)到α-心肌肌球蛋白重鏈的表達(dá)(α-MHC)。在
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