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文檔簡介
1、目的:應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)方法,篩選與小兒神經(jīng)母細(xì)胞瘤(NB)相關(guān)的差異表達(dá)蛋白質(zhì)。
方法:收集2011年7月本院小兒外科經(jīng)穿刺活檢病理證實為Ⅳ期神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)本3例,以及化療后術(shù)后切除腫瘤標(biāo)本3例,患兒年齡1歲6個月-6歲3個月,平均年齡3歲2個月。對化療前后神經(jīng)母細(xì)胞瘤組織全蛋白進(jìn)行二維凝膠電泳(2-DE),獲取雙向凝膠電泳圖譜,通過圖像分析軟件對圖譜進(jìn)行分析比對后,從凝膠上切取差異表達(dá)的蛋白質(zhì)斑點,經(jīng)膠內(nèi)酶解,應(yīng)用超高效納升
2、液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜(nanoUPLC-ESI-MS/MS)進(jìn)行鑒定,并對鑒定蛋白質(zhì)進(jìn)行生物信息學(xué)分析。
結(jié)果:建立了組織化療前后雙向電泳圖譜,應(yīng)用圖像分析軟件共發(fā)現(xiàn)化療后有7個差異表達(dá)明顯的蛋白質(zhì)斑點,其中有2個蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào),分別為Nm23蛋白和神經(jīng)多肽h3;5個蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào),分別為癌蛋白18、熱休克蛋白27,線粒體的烯酰脂輔酶A、過氧化物酶1和過氧化物酶3。
結(jié)論:應(yīng)用2-DE和nano-UPLC-ESI
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