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1、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文豬群中豬圓環(huán)病毒帶毒情況的調(diào)查及豬圓環(huán)病毒1型熒光定量PCR方法的建立姓名:孫麗華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師:郝永清宋長(zhǎng)緒20070501InvestigationonthePorcineCircovirusVirusesandTheEstablishmentofFluorescenceQuantityPeRforPCVl^bstractPorcineeircovirusVirustype2(P
2、CV2)isthecausativeagentofpostwcaningmultisystemicwastingsyndrome(PMWS)thathasbecomeanemergingandimportantdiseaseinswine耽eORF2geneisthemainregionencodingthestructuralproteinthatcanbeusedtodifferentiatePCVlandPCV2Inthepres
3、entstudytheepidemiologicaldiseaseassociatedwithPCV2andPCVlinfectionwasinvestigatedandPeRwasapplied翁rthedetectionofPCV2andPCVlintissuesfromdiseasedordeadpigsinSouthChinaregionandHighfeverregionTirthteenPCV2isolatesandelev
4、enPCVlisolateswereisolatedfromtheclinicalsamples玨ecompletegenomesequencefortheisolatesweredeterminedandcomparedwithotherPCV2andPCVlstrains1144swinetissuesamplescollectedfromSouthChinaweresubjectedtothenestedPCRassayforbe
5、thPCVlandPCV2Theresultsshowedthat21(146%))tissuesampleswerePCVlpositive,40(278%)PCV2positive,andinterestingly7(49%)sampleswerepositiveforbOththePCVlandPCV298swinetissuesamplescollectedfrom“Mysteryfeversyndrome”pigswe∞sub
6、jectedtothenestedPeRassayforbothPCVlandPCV2796%PCV2positive,7%PCV2positiveneresultindicateinthe“Mysteryfeversyndrome“pigsherds,thePCV2infectionwerequiteseverity。2ElevenPCVlcompletegenomeswereamplifiedfrompigtissuethirtee
7、nPCVlcompletegenomeswereamplifiedfrompigtissues11begenomesequencesweredetermined,andtheresultsdemonstratedthatthecompletegenomeofallthe11PCVlisolateswere1759bpinlengththecompletegenomeofallthe13PCV2isolateswere1767bpinle
8、ngth,F(xiàn)ivePCV2isolatesvariancewereverylittleofSouthChinaEightPCV2isolatesvariancewereprodigiousofHigllfeverregion3ApairofprimerswasdesignedaccordingtothePCVlsequenceinGenbankandtheORF2geneWasamplifiedbypolymerasechainreac
9、tion(PER)Meanwhile,accordingtotheknownORF2genesequencesofPCVlsurveyedbyourlaboratorypreviouslyapairofprimersandaTaqManprobeweredesigned弧cFOPeRassayWascarriedoutbyquantitativeconcentrationofserial10folddilutionsofpMDORF2D
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