2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:研究大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cell,MSCs)經(jīng)不同濃度的腫瘤壞死因子-a(tumor necrosis factor alpha,TNF-a)、粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-colony-stimulating factor,G-CSF)及血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)預(yù)處理后不同時(shí)間段

2、,其表面黏附分子L-選擇素(L-selectin,CD62L)和血管細(xì)胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1,CD106)的表達(dá)的變化,以及其表達(dá)變化與細(xì)胞因子濃度之間的關(guān)系,從而為經(jīng)細(xì)胞因子預(yù)處理的MSCs用于移植治療心力衰竭提供一個(gè)最佳的細(xì)胞因子濃度,為提高移植成功率打下基礎(chǔ)。 方法: 1.大鼠MSCs的培養(yǎng):采用密度梯度離心法收集大鼠MSCs并用貼壁培養(yǎng)法對(duì)

3、其進(jìn)行擴(kuò)增和純化。 2.大鼠MSCs的鑒定:采用免疫組化的方法進(jìn)行細(xì)胞鑒定。 3.細(xì)胞因子預(yù)處理:于不同孔板細(xì)胞中加入不同濃度TNF-a(濃度分別為100pg/ml、1ng/ml和10ng/ml)、G-CSF(濃度分別為1ng/ml、10ng/ml和100ng/ml)和VEGF(濃度分別為 1ng/ml、10ng/ml和100ng/ml)分別作用12小時(shí)和24小時(shí)。 4.大鼠MSCs的消化分離以及標(biāo)記:將貼壁生長(zhǎng)

4、的大鼠MSCs經(jīng)消化后加入PBS溶液進(jìn)行洗滌離心,收集細(xì)胞,使之成為單細(xì)胞懸液,后加入熒光標(biāo)記的流式抗體,于暗箱孵育三十分鐘。 5.?dāng)?shù)據(jù)記錄:采用流式細(xì)胞儀(flow cytometer,F(xiàn)CM)對(duì)大鼠MSCs表面的黏附分子CD62L和CD106的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果: 1.培養(yǎng)的大鼠MSCs呈成纖維細(xì)胞樣表型,貼壁生長(zhǎng),經(jīng)擴(kuò)增傳代后細(xì)胞呈紡錘樣,分布均勻,其余血細(xì)胞幾乎消失,經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定CD44和CD9

5、0呈陽性,CD45和CD34呈陰性,為大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞。 2.經(jīng)TNF-a預(yù)處理12小時(shí)的大鼠MSCs經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)其表面CD62L和CD106均成陽性表達(dá)的細(xì)胞占所檢測(cè)細(xì)胞的百分比與未加入任何細(xì)胞因子預(yù)處理的空白組大鼠MSCs相比較,當(dāng)TNF-a濃度分別為100pg/ml時(shí),1ng/ml時(shí),10ng/ml時(shí),與空白組比較P=0.029(P<0.05),不同濃度組間比較P=0.007(P<0.01);而作用24小時(shí)后其CD

6、62L,CD106的雙陽性表達(dá)率在濃度分別為100pg/ml,1ng/ml, 10ng/ml時(shí),與空白組比較P=0.029(P<0.05),不同濃度組間比較P=0.007(P<0.01),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3.用G-CSF預(yù)處理12小時(shí)的大鼠MSCs其表面CD62L和CD106雙陽性表達(dá)百分比在其濃度分別為1ng/ml,10ng/ml和100ng/ml時(shí)表面CD62L和CD106雙陽性表達(dá)百分比與空白組相比P=0.029(P

7、<0.05);處理24小時(shí)后其表面CD62L,CD106雙陽性表達(dá)率與空白組相比P=0.029(P<0.05);不同濃度組間比較P=0.007(P<0.01),差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 4.用VEGF預(yù)處理12小時(shí)的大鼠MSCs表面CD62L和CD106雙陽性表達(dá)百分比在濃度為1ng/ml時(shí),與空白組比較P=(P>0.05),10ng/ml時(shí)表面CD62L和CD106雙陽性表達(dá)百分比與空白組比較P=0.886(P>0.05),在濃度

8、為100ng/ml時(shí)表面CD62L和CD106雙陽性表達(dá)百分比與空白組比較P=1(P>0.05);處理24小時(shí)后,各濃度組表面CD62L,CD106的雙陽性表達(dá)率與空白組相比較,其P值分別為0.486(P>0.05),1(P>0.05)和0.886(P>0.05),差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。不同濃度組間P=0.926(P>0.05),也無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義. 5.12小時(shí)和24小時(shí)兩個(gè)預(yù)處理時(shí)間點(diǎn)之間相比較.P>0.05,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

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