骨髓間充質(zhì)干細胞對缺氧-復氧(損傷星形膠質(zhì)細胞TrKB-Bcl-2)蛋白表達的影響.pdf

1、目的：建立星形膠質(zhì)細胞（Astrocyte AS）缺氧／復氧損傷模型，觀察骨髓間充質(zhì)干細胞（Bone Marrow stromal cells BMSCs）對缺氧／復氧后AS凋亡和TrkB/Bcl-2蛋白表達變化的影響。探討B(tài)MSCs治療腦缺血損傷的可能機制。
　　 方法：提取SD大鼠的BMSCs和新生SD大鼠的AS原代培養(yǎng)，并傳代、擴增、鑒定。采用三氣培養(yǎng)箱，將AS缺氧8h后再恢復正常培養(yǎng)條件建立AS缺氧／復氧損傷模型。采用T

2、ranswell共培養(yǎng)板將缺氧8h后的AS與BMSCs共培養(yǎng)12h、24h、36h、48h、60h。實驗分為正常對照組(N組)、缺氧／復氧組(H/R組)、共培養(yǎng)組（C組）。觀察BMSCs對缺氧／復氧后AS凋亡和TrkB/Bc1-2蛋白表達變化的影響。采用Annexin V-FTTC檢測AS細胞的凋亡，Western blot檢測TrkB/Bcl-2蛋白表達，SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。
　　 結(jié)果：1．成功分離、純化、

3、擴增、鑒定大鼠BMSCs、新生大鼠AS，均達到實驗要求的純度。2．建立星形膠質(zhì)細胞缺氧／復氧損傷模型，并應用Transwell共培板將其與BMSCs成功共培養(yǎng)。3．共培養(yǎng)24h后共培養(yǎng)組AS的凋亡率明顯低于缺氧／復氧組(P＜0.05)。4．缺氧8h后，缺氧／復氧(H/R)組、共培養(yǎng)(C)組TrkB表達增多，蛋白24h表達升高達峰值，此后雖有所降低但仍維持較高水平，組間兩兩比較，對照組低于缺氧／復氧(H/R)組(P＜0.05)，缺氧／復氧

4、(H/R)組低于共培養(yǎng)組(P＜0.05):Bcl-2蛋白表達亦明顯上調(diào)，高峰出現(xiàn)于24h，組間兩兩比較，對照組低于缺氧／復氧（H/R）組（P＜0.05），缺氧／復氧（H/R）組低于共培養(yǎng)組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：1．缺氧／復氧后的AS細胞損害隨著時間延長逐漸加重。2．缺氧／復氧后的AS細胞TrkB/Bcl-2通路活性增強。3.BMSCs可能通過調(diào)控缺氧／復氧損傷AS細胞TrkB/Bcl-2通路活性來抑制AS凋亡，從而減輕