Th1-Th2-Th17細(xì)胞因子在活動(dòng)性結(jié)核與隱性結(jié)構(gòu)感染者產(chǎn)生的特點(diǎn).pdf

1、目的:結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)感染是一重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題，據(jù)2011年WHO公布的數(shù)據(jù)顯示，每年估計(jì)有870萬(wàn)的新增感染病例，而每年約有140萬(wàn)人死于結(jié)核病。分枝桿菌感染機(jī)體后會(huì)產(chǎn)生一系列不同的結(jié)果，包括急性肺部結(jié)核感染、慢性開放性感染（可向肺部或其它組織播散）、隱性感染(Latent Tuberculosis Infection，LTBI)。隱性感染即已經(jīng)感染結(jié)核桿菌，但尚未出現(xiàn)臨床癥狀和胸

2、片異常表現(xiàn)，也不具有傳染性，但病原體并未完全被清除。這些隱性感染者，雖然無(wú)明顯癥狀，但他（她）們是活動(dòng)性結(jié)核的“后備軍”。如果將這些隱性感染者從人群中篩選出來(lái)，進(jìn)行針對(duì)性治療，對(duì)防止其發(fā)展為活動(dòng)性結(jié)核有重要意義。
　　方法:采用病例和對(duì)照研究方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。選取在河北省胸科醫(yī)院住院的結(jié)核病患者24例作為活動(dòng)性結(jié)核病例組(ATB)，選取與結(jié)核病人密切接觸的護(hù)士和醫(yī)生26例作為隱性感染者（LTBI）;選取在河北省人民醫(yī)院進(jìn)行健康體檢

3、的24例為對(duì)照。所有被納入本項(xiàng)研究的人員均注射過(guò)卡介苗(BCG)。
　　取采血后6h以內(nèi)的新鮮EDTA抗凝血100μl，放入24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，再加入含有10％新生牛血清的RPMI-1640完全培養(yǎng)基900μl，和終濃度分別為100μg/ml和5μg/ml的結(jié)核菌素(PPD)和植物凝集素(PHA)，充分混勻，在37℃含飽和水汽、5％的CO2培養(yǎng)箱中連續(xù)培養(yǎng)7d。然后收集培養(yǎng)上清，-80℃保存?zhèn)溆?。采用流式液相多重蛋白定量檢測(cè)技術(shù)(C

4、ytometricBead Array,CBA)測(cè)定培養(yǎng)上清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ和IL-17A的水平，并通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析這些細(xì)胞因子在隱性結(jié)核感染中的診斷價(jià)值。
　　結(jié)果:
　　1本研究選取的24例活動(dòng)性結(jié)核病例，26例隱性結(jié)核感染者，24例為健康對(duì)照者，均為女性，年齡26.44±7.53歲。三組年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2活動(dòng)性結(jié)核組的Th1型細(xì)胞因子產(chǎn)生明顯減

5、少。其中正常對(duì)照組、隱性感染組及活動(dòng)性結(jié)核組的外周血培養(yǎng)上清中IFN-γ分別為964.70±697.73(pg/mL)、1083.19±754.55(pg/mL)、584.07±318.19(pg/mL),活動(dòng)性結(jié)核組顯著低于健康對(duì)照和隱性感染組（P=0.039，P=0.001），健康對(duì)照和隱性感染組間未見顯著性差異(P=0.169)。正常對(duì)照組、隱性感染組及活動(dòng)性結(jié)核組的TNF-α的水平分別為427.83±466.37(pg/mL)、

6、433.08±382.47(pg/mL)、166.81±151.61(pg/mL)(pg/mL)，活動(dòng)性結(jié)核組顯著低于健康對(duì)照和隱性感染組（P=0.014，P=0.011），健康對(duì)照和隱性感染組間未見顯著性差異(P=0.959)。正常對(duì)照組、隱性感染組及活動(dòng)性結(jié)核組的IL-2水平分別為1469.53±744.38(pg/mL)、1166.11±703.96(pg/mL)、428.47±259.18(pg/mL)，活動(dòng)性結(jié)核組顯著低于健康

7、對(duì)照和隱性感染組（P=0.001，P=0.001），健康對(duì)照和隱性感染組間未見顯著性差異(P=0.083)。
　　3活動(dòng)結(jié)核患者IL-4產(chǎn)生明顯減少。正常對(duì)照組、隱性感染組及活動(dòng)性結(jié)核組的外周血培養(yǎng)上清中IL-4分別為1.85±1.43(pg/mL)、1.77±2.16(pg/mL)和0.85±0.94(pg/mL)。與健康對(duì)照組和隱性感染組相比，活動(dòng)性結(jié)核患者的IL-4產(chǎn)生明顯降低(P=0.034，P=0.047);但健康對(duì)照組

8、與隱性感染者的IL-4產(chǎn)生均沒(méi)有顯著差別（P=0.861）。
　　健康對(duì)照組、隱性感染組及活動(dòng)性結(jié)核組IL-10的水平分別為22.25±20.97(pg/mL)、28.15±43.26(pg/mL)及24.87±27.20(pg/mL)，三個(gè)研究對(duì)象的IL-10產(chǎn)生未見明顯差異（P值均大于0.05）。
　　4活動(dòng)性結(jié)核患者IL-17A產(chǎn)生減少
　　正常對(duì)照組、隱性感染組及活動(dòng)性結(jié)核組的外周血培養(yǎng)上清中IL-17A分別為

9、1.06±1.29(pg/mL)、0.91±1.08(pg/mL)和0.09±0.16(pg/mL)。與健康對(duì)照組和隱性感染組相比，活動(dòng)性結(jié)核患者的IL-17A產(chǎn)生明顯降低(P=0.001，P=0.005);但健康對(duì)照組與隱性感染者的及IL-17A產(chǎn)生均沒(méi)有顯著差別（P=0.575）。
　　健康對(duì)照組、隱性感染組及活動(dòng)性結(jié)核組IL-6的水平分別為956.93±1192.20(pg/mL),1424.32±647.32(pg/mL及

10、1568.24±1739.70(pg/mL)，三個(gè)研究對(duì)象的IL-6產(chǎn)生未見明顯差異（P值均大于0.05）。
　　5 IL-2/IFN-γ比值在健康對(duì)照、隱性結(jié)核感染及活動(dòng)性結(jié)核患者存在差異。本實(shí)驗(yàn)中雖然IL-2和IFN-γ在健康對(duì)照組和隱性感染組間為見到明顯差異，但觀察到IL-2/IFN-γ二者的比值在三個(gè)研究對(duì)象中均有明顯不同。IL-2/IFN-γ比值在健康對(duì)照、隱性感染者及活動(dòng)性感染患者中分別為2.02±1.28、1.40±