2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩78頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、目的:觀察32周以下早產(chǎn)兒不同濃度氧暴露后,外周血單個(gè)核細(xì)胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMCs)內(nèi)p47phox與活性氧簇產(chǎn)生的變化;以及運(yùn)用NADPH氧化酶抑制劑二苯基碘(DPI)和夾竹桃麻素(apocynin)聯(lián)合高濃度氧處理PBMCs后,p47phox與活性氧簇水平的改變,來探討NADPH氧化酶亞單位p47phox調(diào)節(jié)PBMCs內(nèi)活性氧簇升高的機(jī)制,為臨床中減輕早產(chǎn)兒氧化應(yīng)激損傷尋找新

2、的靶點(diǎn)。
  方法:實(shí)驗(yàn)分兩部分進(jìn)行。第一,以臨床中32周以下早產(chǎn)兒為對(duì)象,將其中入院時(shí)診斷為新生兒呼吸窘迫綜合征(Neonatal respiratory distresssyndrom,NRDS)且需要吸氧的患兒作為氧暴露組,根據(jù)吸氧濃度不同分為三組:FiO2<30%為低濃度吸氧組、FiO2在(30-40)%為中濃度吸氧組、FiO2>40%為高濃度吸氧組,每組患兒各10例,其中男18例,女12例。胎齡(28-32)周,體重(1

3、350±138)g,組間患兒胎齡、出生體重?zé)o顯著性差異。同期選擇10例32周以下暫未吸氧的早產(chǎn)兒作為空氣組,其中男5例,女5例。胎齡(30-32)周,體重(1347±116)g。氧暴露組與空氣組間患兒胎齡、出生體重?zé)o顯著性差異,具有可比性。該實(shí)驗(yàn)通過四川醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn),所有患兒進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前均征得家屬同意并簽署知情同意書??諝饨M及氧暴露組患兒不同濃度氧療48小時(shí)后,均經(jīng)橈動(dòng)脈采血3ml。分離取得PBMCs及血清標(biāo)本用于檢測

4、。實(shí)驗(yàn)第二部分,出生后即入我科的32周以下早產(chǎn)兒,尚未吸氧前,征得家屬同意并簽署知情同意書后經(jīng)橈動(dòng)脈采血2 ml,經(jīng)Ficoll密度梯度離心法,分離純化PBMCs,以PBMCs為對(duì)象,將其分為以下四組:常規(guī)培養(yǎng)組,置于37℃、50 ml/L的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h;高氧處理組,按3 L/min通入950ml/L的O2與50 ml/L的CO2混合氣體,10 min后,立即用封口膠密封培養(yǎng)瓶,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h;高氧聯(lián)合DPI處理

5、組與高氧聯(lián)合夾竹桃麻素(apocynin)處理組根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道和預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,分別選擇5μmol/L、100μmol/L處理細(xì)胞后再按上述方法建立高氧損傷模型并培養(yǎng)48 h;高氧及相應(yīng)處理組培養(yǎng)48 h后,均用CYS-1數(shù)字式測氧儀檢測培養(yǎng)瓶中O2的濃度,將低于900 ml/L O2的標(biāo)本棄去。離心采集PBMCs和培養(yǎng)液作為標(biāo)本。將兩部分實(shí)驗(yàn)中所獲得的標(biāo)本,均采用Mitosox Red標(biāo)記結(jié)合激光共聚焦顯微鏡檢測PBMCs內(nèi)ROS的生成量、

6、硫代巴比妥酸比色法檢測血清/培養(yǎng)液中丙二醛含量、免疫熒光檢測p47phox在細(xì)胞內(nèi)的定位及移位率、Western blot檢測p47phox的蛋白表達(dá)量。
  結(jié)果:第一,臨床樣本中,隨著早產(chǎn)兒吸氧濃度的升高,PBMCs內(nèi)活性氧與血清丙二醛明顯升高,p47phox由包質(zhì)向包膜移位的細(xì)胞數(shù)增多,p47phox的移位率明顯增加,p47phox的蛋白表達(dá)量也隨之增加(P均<0.05);第二,培養(yǎng)PBMCs各組中,PBMCs經(jīng)高氧及相應(yīng)藥

7、物處理48h后,與高氧處理組相比,其余三組活性氧和丙二醛明顯減少,p47phox移位率與表達(dá)量也顯著降低(P均<0.05);與常規(guī)培養(yǎng)組相比,高氧聯(lián)合DPI處理組及高氧聯(lián)合apocynin處理組中ROS、丙二醛、p47phox移位率與表達(dá)量并無顯著差異(P均>0.05)。
  結(jié)論:早產(chǎn)兒和PBMCs經(jīng)氧暴露后,p47phox可增加向胞膜移位,上調(diào)其表達(dá)量,這與ROS和丙二醛增加是一致的。而對(duì)PBMCs運(yùn)用NADPH氧化酶抑制劑D

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論