腦出血凝血酶介導(dǎo)的神經(jīng)毒性作用及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分大鼠腦出血后血腫周圍PAR-1mRNA和蛋白表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究目的:探討腦出血(Intracerebral hemorrhage,ICH)后血腫周圍蛋白酶激活受體-1(Protease activated receptor-1,PAR-1)表達(dá)的情況及其與凝血酶(Thrombin,TM)的關(guān)系.方法:膠原酶Ⅶ型、TM、膠原酶Ⅶ型+水蛭素腦內(nèi)立體定向注射制作動(dòng)物模型.在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物,應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢

2、測(cè)PAR-1mRNA表達(dá),應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)PAR-1蛋白表達(dá).第二部分腦內(nèi)注射凝血酶對(duì)血腦屏障通透性的影響及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究目的:探討凝血酶(TM)腦內(nèi)注射對(duì)血腦屏障(BBB)通透性的影響及其可能機(jī)制.方法:在體內(nèi),將TM或TM+組織蛋白酶G(CATG)立體定向注入SD大鼠右側(cè)基底節(jié)區(qū),伊文氏蘭(EB)測(cè)定血腦屏障通透性,干濕重法測(cè)定腦水含量;在體外,將腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)液中加入TM或TM+CATG,倒置顯微鏡下動(dòng)態(tài)