大麻素對大鼠腦出血神經(jīng)元的保護作用及其作用機制的實驗研究.pdf

1、目的：腦出血(ICH)是臨床常見的危急重癥。有研究表明,細胞凋亡參與了腦出血后血腫周圍組織的損傷過程。大麻素類物質具有腦保護作用已經(jīng)被人們愈來愈多的被認可,內(nèi)源性大麻素信號系統(tǒng)(ECS)在腦缺血時被激活這一假說也已經(jīng)被證實,其對損傷灶周圍凋亡神經(jīng)元有保護作用；其主要的保護機制可能主要是通過大麻受體Ⅰ(CB1R)介導,CB1R被激活后可以調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質的傳遞(抑制鈣離子內(nèi)流、抑制谷氨酸鹽的釋放等,舒張血管,降低體溫等；內(nèi)源性大麻素類物質參與

2、因腦缺血而激活的各種機制,從而延緩神經(jīng)元死亡。本課題觀察了大麻素(WIN55,212-2)對實驗性腦出血大鼠的干預作用,研究其對腦出血后周圍半影區(qū)的神經(jīng)元是否具有保護作用,并探討其可能的神經(jīng)保護作用機制。
　　 方法：隨機將大鼠分為假手術組,出血組,WIN55,212-2(Sigma,US)藥物治療組(低劑量組1μg·g-1,中劑量組3μg·g-1,高劑量組5μg·g-1)和陽性對照藥尼莫地平組(德國拜耳醫(yī)藥保健股份公司生產(chǎn),1

3、μg·g-1)。采用微量注射器向蒼白球注射Ⅶ型膠原酶建立大鼠腦出血模型。假手術組僅微量注射0.9％生理鹽水(NS),不做出血處理。術后半小時按照體重經(jīng)腹腔注射藥物,假手術組和出血組注射等量的生理鹽水和二甲基亞砜(DMSO)的混合液。觀察WIN55,212-2對ICH大鼠的行為學改變；腦組織切片HE染色,電鏡下觀察出血側病理形態(tài)學改變；采用免疫組化方法定位蛋白激酶A-β亞單位(PKAC-β)、C-FOS和腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)；采

4、用半定量逆轉錄聚合酶鏈反(RT-PCR)的方法檢測出血側皮質內(nèi)PKAC-β、C-FOS和BDNF mRNA的表達量；采用Western方法檢測出血側皮質內(nèi)PKAC-β和BDNF蛋白的表達量來探討其可能機制。
　　 結果：WIN55,212-2(1、3、5μg·g-1)可顯著改善大鼠腦出血后神經(jīng)肌肉運動功能,改善腦組織神經(jīng)元的病理形態(tài)學。WIN55,212-2能明顯上調(diào)同側大腦皮質內(nèi)BDNF mRNA和蛋白質的表達,同時也上調(diào)C-