細(xì)顆粒物對(duì)細(xì)胞的毒性研究.pdf

1、大氣細(xì)顆粒物的細(xì)胞毒性與顆粒物的粒徑、染毒劑量和顆粒物上吸附的物質(zhì)有關(guān)。為了研究大氣細(xì)顆粒物的細(xì)胞毒性與顆粒物粒徑的關(guān)系，以杭州市城區(qū)居民區(qū)為采樣點(diǎn)，用DLPI分級(jí)采樣器進(jìn)行采用，進(jìn)行了大氣細(xì)顆粒物對(duì)A549細(xì)胞的毒性試驗(yàn)。納米二氧化鈦（納米Ti02)由于其納米特性，也屬于細(xì)顆粒物。為了更全面的評(píng)價(jià)顆粒物對(duì)細(xì)胞的毒性作用，本課題先采用不同粒徑的納米Ti02對(duì)細(xì)胞進(jìn)行毒性試驗(yàn)，研究納米Ti02對(duì)細(xì)胞的毒性作用與其粒徑大小的關(guān)系，進(jìn)一步比較

2、納米Ti02和大氣細(xì)顆粒物對(duì)細(xì)胞毒性的差異。
　　染毒濃度相同時(shí)，納米TiCh粒徑越小，細(xì)胞活性越小，細(xì)胞膜受到的損傷程度越大。大氣細(xì)顆粒物對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染毒也得到了相同的試驗(yàn)結(jié)果，并且納米TiCh和大氣細(xì)顆粒物對(duì)細(xì)胞的最佳毒性濃度（細(xì)胞表現(xiàn)較強(qiáng)毒性作用時(shí)的最低濃度）均為10pg/mL。納米TiCh在水中的溶解度較小，大氣細(xì)顆粒物包括水溶性和水不溶性成分。染毒濃度高于10ng/mL時(shí)細(xì)胞活性變化不大，可能是由于受到其在細(xì)胞培養(yǎng)液中溶解

3、度的影響。
　　在細(xì)胞最佳毒性濃度下對(duì)細(xì)胞氧化損傷進(jìn)行分析，可知細(xì)胞內(nèi)ROS活性隨著納米TiCh粒徑的增加而減小，而GSH水平和SOD水平則與粒徑大小正相關(guān)。大氣細(xì)顆粒物對(duì)細(xì)胞進(jìn)行氧化損傷試驗(yàn)也得到了相同的規(guī)律。顆粒粒徑越小細(xì)胞活性越小，細(xì)胞受到的氧化損傷程度越強(qiáng)，ROS活性越高。而GSH和SOD作為能夠抑制細(xì)胞氧化損傷的酶，細(xì)胞受到氧化損傷時(shí)，其活性降低。
　　RT-PCR測(cè)試細(xì)胞凋亡基因mRNA相對(duì)表達(dá)量發(fā)現(xiàn)，染毒濃度為

4、10pg/mL時(shí)，發(fā)現(xiàn)隨著顆粒粒徑的增加，P53、BCL-2和BAX的相對(duì)表達(dá)量均隨著顆粒物粒徑的增加而減小。納米TiCh和大氣細(xì)顆粒物有相同的趨勢(shì)。這說(shuō)明凋亡基因的表達(dá)的影響與顆粒的粒徑的大小負(fù)相關(guān)，顆粒粒徑越小，對(duì)細(xì)胞的凋亡作用越大，細(xì)胞內(nèi)凋亡基因的表達(dá)量也越大。
　　納米TiCh和大氣細(xì)顆粒物的細(xì)胞毒性試驗(yàn)對(duì)比發(fā)現(xiàn)，雖然納米Ti02和大氣細(xì)顆粒物的粒徑不同，其對(duì)細(xì)胞的毒性趨勢(shì)是相同的。在細(xì)顆粒物的粒徑范圍內(nèi)，A549細(xì)胞的細(xì)