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1、目的:研究坐骨神經(jīng)損傷后不同時間段大鼠脊髓背角P2X3受體的表達、感覺神經(jīng)元數(shù)量及神經(jīng)元損傷超微結(jié)構(gòu)的變化,探討P2X3受體與神經(jīng)元損傷在神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生發(fā)展機制中的作用,為神經(jīng)病理性疼痛的治療提供新的理論基礎(chǔ)。 方法:200~220g雄性SD大鼠40只,隨機分為正常對照組和坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷(CCI)組。CCI組大鼠又分為3組,即CCI術(shù)后3d組、CCI術(shù)后7d組和CCI術(shù)后14d組,每組10只。術(shù)后采用熱板法測定大鼠后爪
2、熱縮足潛伏期(PTWL)的變化,以確定神經(jīng)病理性疼痛模型的成功建立;并于術(shù)后3d、7d和14d處死大鼠,取L4~5脊髓,每組8只用免疫組化實驗測定脊髓背角P2X3受體的表達和HE染色測定脊髓背角神經(jīng)元數(shù)量變化;每組另外2只在透射電鏡下觀察脊髓背角感覺神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果:P2X3受體的表達主要分布在脊髓背角的Ⅱ?qū)樱慌c正常組及健側(cè)相比,CCI大鼠術(shù)側(cè)脊髓背角P2X3受體的表達在術(shù)后7d和14d明顯增加(P<0.05),胞漿
3、著色深度和陽性細胞數(shù)均增加。HE染色光鏡下,與正常組及健側(cè)相比,CCI大鼠在術(shù)后7d和14d術(shù)側(cè)脊髓背角神經(jīng)元數(shù)量明顯減少(P<0.05)。電鏡下,CCI大鼠在術(shù)后3d L4~5節(jié)段脊髓術(shù)側(cè)背角淺層神經(jīng)元形態(tài)學(xué)典型變化為:細胞腫脹,胞膜完整,胞漿內(nèi)大量空泡,核結(jié)構(gòu)基本正常,呈Paraptosis表現(xiàn);7d和14d神經(jīng)元形態(tài)變化:細胞皺縮、密度增大,核帶增多及染色質(zhì)濃聚貼附于核膜,呈凋亡形式程序性細胞死亡表現(xiàn)。 結(jié)論:CCI神經(jīng)病
4、理性疼痛模型中,大鼠P2X3受體的表達在術(shù)后7d和14d明顯上調(diào),而且P2X3受體在脊髓的分布主要在與疼痛信息傳遞相關(guān)的背角Ⅱ?qū)樱淮笫蠹顾璞辰巧窠?jīng)元術(shù)后3d感覺神經(jīng)元Paraptosis形式程序性細胞死亡;術(shù)后7d和14d呈凋亡形式程序性細胞死亡,并且神經(jīng)元數(shù)量明顯減少,出現(xiàn)神經(jīng)元的丟失。大鼠脊髓背角P2X3受體的變化與感覺神經(jīng)元數(shù)量的變化及超微結(jié)構(gòu)的變化在時間上有一致性,表明脊髓背角P2X3受體和感覺神經(jīng)元的丟失及凋亡與神經(jīng)病理性疼痛
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