實(shí)驗(yàn)性肝肺綜合癥大鼠肺組織血紅素氧合酶-1的表達(dá)與定位.pdf

1、肝硬化、門(mén)靜脈高壓、甚至急性肝衰竭都可導(dǎo)致肺臟血管床的復(fù)雜變化，臨床上表現(xiàn)為肝肺綜合癥(HPS)和門(mén)脈肺高壓(PPH)，兩者均與肺臟血管病變相關(guān)，卻又不盡相同。從病理生理學(xué)角度看，HPS是以血管擴(kuò)張為特征，而PPH是血管收縮的結(jié)果；臨床表現(xiàn)上，HPS表現(xiàn)為由于氣體交換障礙而導(dǎo)致的嚴(yán)重缺氧，PPH則主要是對(duì)血液動(dòng)力的影響，最終導(dǎo)致右心衰。早在1956年即有學(xué)者描述了肝肺綜合征的病程及病理生理特征。肝病伴動(dòng)脈缺氧是由多種病因引起的，但嚴(yán)重缺

2、氧即動(dòng)脈血氧分壓(PaO2)小于50mmHg的情況多與HPS相關(guān)。HPS的臨床特點(diǎn)表現(xiàn)為三聯(lián)癥，即①慢性肝臟疾病伴門(mén)脈高壓；②動(dòng)脈缺氧(PaO2＜70mmHg或肺泡-動(dòng)脈氧分壓差＞20mmHg)；③肺血管擴(kuò)張。肝硬化伴缺氧患者，需借助超聲心動(dòng)掃描術(shù)和肺灌注掃描方法檢測(cè)肺血管擴(kuò)張程度，協(xié)助診斷肝肺綜合征。前毛細(xì)血管、毛細(xì)血管擴(kuò)張與動(dòng)靜脈短路是血管擴(kuò)張的兩種基本形式。前者動(dòng)脈缺氧的原因可能是血流通過(guò)毗鄰肺泡的擴(kuò)張血管(直徑＞8μm)過(guò)快，導(dǎo)

3、致氧合不足，即通氣-血流比例失調(diào)。后者靜脈血未經(jīng)氣血交換直接進(jìn)入動(dòng)脈(擴(kuò)張血管直徑＜8μm)，因此無(wú)氧合過(guò)程，即解剖性分流。 HPS的病理生理過(guò)程并不十分清楚，但肝病與缺氧之間的因果關(guān)系是肝移植治療肝肺綜合征的理論基礎(chǔ)。起初對(duì)于伴有HPS的患者進(jìn)行肝移植效果不佳，因此伴有嚴(yán)重缺氧(PaO2＜50mmHg)的肝病是肝移植的禁忌癥。但隨著肝移植患者成活率的提高，肝移植又成為改善HPS缺氧癥狀的有效手段，這種理論也在不斷在完善。最近資

4、料顯示，HPS是增加肝硬化患者發(fā)病率和死亡率的獨(dú)立因素。綜上，目前缺氧已經(jīng)成為等待肝移植患者的優(yōu)先選擇條件。 最近報(bào)道，膽總管結(jié)扎(CBDL)大鼠肺臟內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量和血清中一氧化氮(NO)含量均增加，但迅速抑制NO后只能部分的使缺氧肺血管收縮，因此推測(cè)肝硬化時(shí)NO并不僅起血管擴(kuò)張劑的作用，還可能作為基因調(diào)節(jié)劑刺激其它血管活性物質(zhì)的表達(dá)，如血紅素氧合酶-1(HO-1)。血紅素氧合酶是血紅素降解的限速酶，可催化血

5、紅素生成等摩爾的膽綠素、一氧化碳(CO)和鐵。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)CO與NO一樣具有舒血管效應(yīng)。CO可激活可溶性鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶(sGC)，生成環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)，后者可發(fā)揮各種生理病理作用，如松弛血管平滑肌，抑制血小板聚集等。另外，HO-1過(guò)量表達(dá)使CO過(guò)量產(chǎn)生可在不同病理狀態(tài)下調(diào)節(jié)血管緊張度。最近發(fā)現(xiàn)CBDL大鼠除肝臟外，心臟、腎臟胃等器官中HO-1表達(dá)于活性均增高，提示HO-1途徑在硬化性心肌病、肝腎綜合征、門(mén)脈高壓性胃病中起一定作用。同樣

6、，推測(cè)HO-1可能同樣在HPS中發(fā)揮作用。 CBDL大鼠是通過(guò)膽汁性肝硬化來(lái)復(fù)制人HPS的病理生理過(guò)程，這一模型已經(jīng)用于實(shí)驗(yàn)研究。本研究通過(guò)觀察實(shí)驗(yàn)性HPS大鼠肺組織HO-1的表達(dá)與定位，探討HO-1-CO系統(tǒng)在HPS發(fā)生機(jī)制中的作用。 目的：通過(guò)觀察實(shí)驗(yàn)性HPS大鼠肺組織HO-1的表達(dá)與定位，探討HO-1在HPS發(fā)生機(jī)制中的作用。 方法：采用Sprague-Dawley大鼠，CBDL方法制備HPS動(dòng)物模型，共1

7、8只，隨機(jī)分為假手術(shù)組(so)、2周組(2wk)和5周組(5wk)。采用病理染色觀察肝硬化形成情況，病理及電鏡觀察肺血管擴(kuò)張情況，血?dú)夥治鰴z測(cè)動(dòng)脈血氧分壓，從而驗(yàn)證造模情況。應(yīng)用免疫組化方法觀察HO-1蛋白在肺血管的表達(dá)和分布特點(diǎn)，應(yīng)用Westernblot方法檢測(cè)肺組織HO-1的蛋白表達(dá)，采用RT-PCR方法檢測(cè)肺組織中HO-1mRNA的表達(dá)。 結(jié)論：CBDL大鼠可較好的復(fù)制HPS模型用于實(shí)驗(yàn)研究；HO-1的增加可能HPS重要