AHPA類氨肽酶N抑制劑的設(shè)計、合成與初步活性評價.pdf

1、氨肽酶N(APN)是一類膜型鋅離子依賴性的外肽酶，在很多組織包括腸、腎、肝以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)中都有廣泛分布。該酶參與了營養(yǎng)素的最終水解和生物活性分子腦啡肽和內(nèi)啡肽降解的失活。另外，APN也是冠狀病毒的一個受體，并參與了抗原表達的過程。更為重要的是，Saiko及其同事確定了這個CD13抗原參與了腫瘤細胞的侵襲和細胞外基質(zhì)的降解。因此APN是研究抗腫瘤抗病毒藥物的一個重要靶點，這就要求發(fā)展高效低毒的、高選擇性的APN抑制劑。 基于已知

2、APN抑制劑的三維結(jié)構(gòu)以及酶—抑制劑復(fù)合物的結(jié)合模式，利用tripos公司的symble軟件進行分析和優(yōu)化，本文設(shè)計并合成了一個系列共二十個AHPA衍生物。本研究以溴代苯乙烷為基本骨架，經(jīng)取代、加成反應(yīng)得到關(guān)鍵中間體硝基—AHPA，再經(jīng)縮和、還原合成得到目標(biāo)化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)經(jīng)過紅外光譜、電噴霧質(zhì)譜和核磁共振譜(氫譜、碳譜)確證。 所合成的化合物均進行了體外初步生物活性評價，體外抑酶試驗，選擇氨肽酶N(APN)進行活性篩選。在抑

3、制APN活性試驗中，以L-亮氨?！獙ο趸桨窞榈孜铮瑴y定化合物對APN的抑制活性；試驗結(jié)果表明，本文設(shè)計合成的大多數(shù)目標(biāo)化合物均具有較好的抑制APN的活性，其中化合物ZX3、ZX4和ZX6的IC50分別是0.51、0.57和2.18μM(Bestatin，IC50=25.01μM)。初步構(gòu)效關(guān)系分析，含有脂肪側(cè)鏈氨基側(cè)鏈活性較強，取代芳香環(huán)或直鏈活性較低；化合物的立體構(gòu)型對抑酶活性有重要影響，同一結(jié)構(gòu)的化合物不同構(gòu)型間的抑酶能力差別很大