淋球菌高水平多重耐藥機(jī)制的研究.pdf

1、中南大學(xué)碩士學(xué)位論文淋球菌高水平多重耐藥機(jī)制的研究姓名：王冬梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：醫(yī)學(xué)微生物學(xué)指導(dǎo)教師：夏忠弟20050501H i g h —l e v e lm u l t i p l e r e s i s t a n tm e c h a n i s mo f N e i s s e r i ag o n o r r h o e a eA B S T R A C To b j e c t i v e T o s c r e

2、e n h i g h —l e v e l m u l t i p l e r e s i s t a n t N e i s s e r i ag o n o r r h o e a e ，t oi n v e s t i g a t et h ec o r r e l a t i o nb e t w e e nh i g h —l e v e lm u l t i p l er e s i s t a n c eo f N e

3、i s s e r i ag o n o r r h o e a ea n dm u t a t i o n si nt h e 1 3 b pi n v e r t e ds e q u e n c e w i t h i n t h e m t r R p r o m o t e r r e g i o n ，t oe x p l o r et h ei n f l u e n c eo f e f f l u xp r o t e

4、 i n sm t r D 、m t r Fe x p r e s s i o ni n d u c e db yt h em u t a t i o n s ．t os t u d y t h e c e l l e n v e l o p ep e r m e a b i l i t y w h i c hm a yi n f l u e n c e h i g h - l e v e lm u l t i p l er e s i

5、 s t a n tN e i s s e r i ag o n o r r h o e a e ．a(chǎn) l lo f w h i c h m a y g i v ei n s i g h tt oh i g h - l e v e lm u l t i p l e r e s i s t a n tm e c h a n i s m o f N e i s s e r i a g o n o r r h o e a e ．M e t h

6、 o d s ( 1 ) T h es u s c e p t i b i l i t y o f5 8 g o n o c o c c a l s w a i n s t o 5a n t i m i c r o b i a la g e n t sw a s t e s t e db y d i s cd i f f u s i o nm e t h o d ：t h em i n i m u mi n h i b i t o r

7、y c o n c e n t r a t i o n ( M I C ) o fe r y t h r o m y c i n w a s d e t e r m i n e d b yt u b ed i l u t i o nm e t h o d ．( 2 ) M u t a t i o n s i n1 3 b pi n v e r t e ds e q u e n c e p o s i t i o n e dw i m i

8、 n t h em t r R p r o m o t e r r e g i o n w e r e e x a m i n e d b y P o l y m e r a s e C h a i nR e a c t i o n - S i n g l eS t r a n dC o n f o r m a t i o nP o l y m o r p h i s m ( P C R - S S C P ) ，1 4s t r a

9、i n sw e r es e l e c t e da n dd i r e c t l ys e q u e n c e d ．( 3 ) T h ed i f f e r e n c eo f m t r Da n dm t r Fg e n ee x p r e s s i o nb e t w e e nm u t a n ta n ds u s c e p t i v es t r a i n sw a sd e t e c

10、 t e d b y s e m i —q u a n t i t a t i v e R T - P C R ．( 4 ) 1 1 l e e x p r e s s i o n o fp o r i np r o t e i n b e t w e e n m u t a n t a n d s u s c e p t i v e s t r a i n s w a s d e t e c t e d b yS D S ．P A G

11、 E ．R e s u l t s ( 1 ) T h e r e w e r e 3 0s t r a i n sp r e s e n t i n g r e s i s t a n tt o2 o r m o r et h a n2a n t i m i c r o b i a la g e n t s ．w h i c ha c c o u n t e df o r5 1 ．7 ％o f5 8c l i n i c a ls t

12、 r a i n s ：T h e r ew e r e3 4s t r a i n sw i t he r y t h r o m y c i nM I C f r o m1 ．0 t o3 2 ．0 弘g ／m la n d1 7s t r a i n sw i t he r y t h r o m y c i nM I C ≥3 2 。O t a g ／r n l ．( 2 )O n es o r to f P C R ．S S

13、C P p a R e m W a Sf o u n di n1 4i s o l a t e sw h o s ep a t t e r n sw e r e d i f f e r e n tf r o m t h ew i l dt y p e ，a n d t h e p a 魅e r n so f 4 4 i s o l a t e sw e r e t h es a m ea st h ew i l dt y p e ．A

14、l lt h e 14s e q u e n c e ds t r m n sc o n t a i n e dt h es a m em u t a t i o na n de x h i b i t e das i n g l eA ／Tb a s ep a i rd e l e t i o ni n 1 3 b pi n v e 蛙e ds e q u e n c e p o s i t i o n e dw i t h i nt

15、 h em t r R p r o m o t e r r e g i o n ．A m o n g1 4s t r a i n se x c e p t o n ew i t hs u s c e p t i b i l i t y t o 5 a n t i m i c r o b i a la g e n t s ，t h e r e s tw i t he r y t h r o m y c i nM I C ≥3 2 ．0 p