線粒體DNA 14783、15235多態(tài)性與2型糖尿病的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：2型糖尿病(Type2 diabetes mellitus，T2DM)是在遺傳背景下，由環(huán)境因素激發(fā)所引起的一種慢性高血糖狀態(tài)，具有遺傳異質(zhì)性。已研究發(fā)現(xiàn)20余種線粒體DNA(mitochondrial DNA，mtDNA)多態(tài)性與T2DM相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)旨在研究mtDNA CYB基因14783T→C，15235A→G位點(diǎn)變異與2型糖尿病、高血壓及肥胖的關(guān)系。 方法：研究對(duì)象均來(lái)自大連市，T2DM患者包括2005年1月至20

2、06年2月大連地區(qū)T2DM家系調(diào)查中收集的T2DM患者61人，國(guó)家95攻關(guān)糖尿病普查大連地區(qū)散發(fā)T2DM患者64人，2004年至2006年在大連市中心醫(yī)院就診的T2DM患者28人，共計(jì)153人，其中男性71人，女性82人，平均年齡56．56±13.62歲。大連地區(qū)正常人198人，其中包括男性104人，女性95人，平均年齡50.31±10.59歲，空腹血糖<5.6mmol/L及OGTT血糖<7.8mmol/L，無(wú)其他內(nèi)分泌疾病，無(wú)DM家族

3、史。T2DM組又根據(jù)亞太地區(qū)肥胖標(biāo)準(zhǔn)分為T2DM肥胖組和T2DM非肥胖組。確定樣本后，采集血樣，提取有核細(xì)胞基因組DNA，根據(jù)CYB基因序列設(shè)計(jì)引物，用多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)(PCR)．?dāng)U增所需片段，片斷長(zhǎng)度589bP，然后分別用VspI內(nèi)切酶、OpnI內(nèi)切酶在37℃恒溫空氣循環(huán)箱中消化過(guò)夜，以8﹪聚丙烯酰胺凝膠(PAGE)電泳分離酶切產(chǎn)物，鑒別不同的基因型。分別比較T2DM組與正常對(duì)照組的基因型分布及頻率，T2DM合并肥胖亞組與非肥胖亞組的

4、基因型分布及頻率，T2DM合并高血壓亞組與非高血亞組的基因型分布及頻率，并將基因型和T2DM、肥胖及高血壓危險(xiǎn)因素進(jìn)行x<'2>檢驗(yàn)。 結(jié)果： 1．mtDNA 14783 T→C變異(1)在對(duì)mtDNA 14783 T→C變異與T2DM相關(guān)性的研究中發(fā)現(xiàn)T2DM病例組和對(duì)照組中的分布頻率分別為60.1﹪和59.1﹪，經(jīng)x<'2>檢驗(yàn)無(wú)顯著差異(X<'2>=0.039，P=0.844)。 (2) 在肥胖亞組中，m

5、tDNA 14783 T→C變異在肥胖亞組和非肥胖亞組中的分布頻率分別為61.3﹪和59.0﹪，經(jīng)X<'2>檢驗(yàn)無(wú)顯著差異(X<'2>=0.089， P=0.766)。 (3) 在高血壓亞組中，mtDNA 14783 T→C變異在高血壓亞組和非高血壓亞組中的分布頻率分別為62.5﹪和58.8﹪，經(jīng))X<"2>檢驗(yàn)無(wú)顯著差異(X<'2>=0.207，P=0.649)。 2．mtDNA 15235 A→G變異(1) 在對(duì)

6、mtDNA 15235A→G變異與T2DM相關(guān)性的研究中發(fā)現(xiàn)T2DM病例組和對(duì)照組中的分布頻率分別為2.6﹪和4.0﹪，經(jīng)X<'2>檢驗(yàn)無(wú)顯著差異(X<'2>=0.532，P=0.466)。 (2) 在肥胖亞組中，mtDNA 15235 A→G變異在肥胖亞組和非肥胖亞組中的分布頻率分別為2.6﹪和2.6﹪，經(jīng)X<'2>檢驗(yàn)無(wú)顯著差異(X<'2>=0.002， P=0.968)。 (3) 在高血壓亞組中，mtDNA 1