移植后血流感染相關研究及腎移植感染基因多態(tài)性研究.pdf

1、本研究分兩部分，包括進行實體器官移植后血流感染休克及死亡的危險因素研究及進行腎移植術后感染基因多態(tài)性研究。第一部分通過回顧性分析98例實體器官移植受者發(fā)生的133次血流感染，評估可能導致受者發(fā)生感染性休克或死亡的危險因素，同時回顧性分析2002年1月至2012年1月間合并有血流感染的肝移植受者的死亡危險因素，以及分析本院在2008年1月至2010年4月間的21例進行肝或腎移植術并術后發(fā)生血流感染的受者的菌株以了解病原菌分布及其耐藥性。<

2、br>　　結(jié)果發(fā)現(xiàn)與實體器官移植受者合并血流感染時死亡率升高顯著相關的危險因素為感染性休克和血小板計數(shù)＜50，000/mm3;復數(shù)菌血流感染及早發(fā)型血流感染（移植術后第2周至第8周發(fā)生）是實體器官移植受者中感染性休克發(fā)生的獨立危險因素;與肝移植合并血流感染的死亡率顯著相關的危險因素包括升高的血清肌酐值及感染性休克;本院2008年1月至2010年4月間肝或腎移植術后發(fā)生血流感染中的病原菌以G。桿菌占優(yōu)勢，病原菌普遍對臨床常用抗生素有較高耐

3、藥性。
　　第二部分了解IL-1β(-511C/T)與IL-1受體拮抗劑（86bp可變數(shù)量串聯(lián)重復）基因多態(tài)性與腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生血流感染的相關性，并對TNFβ、IL-10、IL-1β和IL-1受體拮抗劑基因多態(tài)性能否預測腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生肺部感染進行調(diào)查，并結(jié)合其他影響因素評價甘露糖結(jié)合凝集素-2及纖維膠凝蛋白-2基因多態(tài)性與腎移植術后發(fā)生血流感染的相關性。
　　結(jié)果發(fā)現(xiàn)腎移植受者IL-1β-511CC基因型及IL-1

4、β-511C的等位基因與腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生血流感染具相關性;受者TNFβ基因多態(tài)性是肺部感染的獨立危險因素;受者甘露糖結(jié)合凝集素-2基因的5'非翻譯區(qū)QQ+PQ基因型與血流感染的發(fā)生相關，F(xiàn)CN2外顯子8區(qū)Thr236Met(+6359 C＞T)變異體是腎移植術后發(fā)生血流感染的獨立危險因素。
　　第一部分實體器官移植后血流感染休克及死亡危險因素
　　第一章實體器官移植受者血流感染死亡危險因素
　　目的:尋找導致實體器

5、官移植受者發(fā)生血流感染時導致死亡率增高的危險因素。
　　方法:回顧性分析98例實體器官移植受者發(fā)生的133次血流感染，評估可能的導致受者死亡的危險因素。依靠單因素分析和logistic回歸方法來確立導致血流感染相關死亡的危險因素。
　　結(jié)果:入組受者平均年齡為42.3(42.3±12.8)歲。受者中絕大多數(shù)是院內(nèi)獲得性感染(79.6％)，血流感染導致的死亡率為39.8％(39/98)。單因素分析顯示腹腔內(nèi)/膽道感染(P=0.

6、011)、復數(shù)菌感染(P＜0.001)、肝移植(P=0.002)、血小板計數(shù)＜50，000/mm3(P＜0.001)、淋巴細胞計數(shù)＜300/mm3(p=0.027)及感染性休克(P＜0.001)等變量在死亡組及存活組中存在顯著差別。logistic回歸分析顯示感染性休克和血小板計數(shù)＜50，000/mm3是導致實體器官移植血流感染相關死亡的獨立危險因素。
　　結(jié)論:與實體器官移植受者合并血流感染時死亡率升高顯著相關的危險因素為感染性

7、休克和血小板計數(shù)＜50，000/mm3。選擇了恰當?shù)目股剡M行治療的受者中血流感染導致的死亡率依然相當高，實施恰當?shù)拇胧┮灶A防實體器官移植受者血流感染的發(fā)生提高受者生存率較治療本身更為重要和可靠。
　　第二章實體器官移植受者血流感染并感染性休克危險因素
　　目的:調(diào)查實體器官移植受者發(fā)生血流感染同時合并感染性休克的危險因素。
　　方法:回顧性調(diào)查98例實體器官移植受者包括進行腎、心臟、胰腎聯(lián)合、肝腎聯(lián)合或者原位肝移植的

8、臨床資料。根據(jù)美國疾病控制中心制定的相應標準，對98例實體器官移植受者合并血流感染時所有有意義的變量進行單因素及l(fā)ogistic回歸分析。
　　結(jié)果:該98例實體器官移植受者共發(fā)生133次血流感染。39例受者發(fā)生感染性休克(39/98)，其中31例受者(79％)死亡。98例血流感染受者中，革蘭氏陰性菌占38.5％，革蘭氏陽性菌占15.4％，真菌占2.6％以及復數(shù)菌占43.5％。肺部來源占41.8％，是本研究血流感染病原體中最常見的

9、來源部位。腹腔內(nèi)/膽道來源緊隨其后，占24.5％。單因素分析中，術后第2周至第8周發(fā)生的血流感染(P=0.014)、復數(shù)菌血流感染（P=0.001）、腹腔內(nèi)/膽道部位來源(P=0.011)和肝移植（P=0.002）在休克組及非休克組中存在顯著性差異。logistic回歸分析中，只有復數(shù)菌血流感染和術后第2周至第8周發(fā)生的血流感染能夠獨立預測實體器官移植合并血流感染的受者中感染性休克的發(fā)生。
　　結(jié)論:復數(shù)菌血流感染及早發(fā)型血流感染

10、（移植術后第2周至第8周發(fā)生）是實體器官移植受者中感染性休克發(fā)生的獨立危險因素。
　　第三章肝移植受者血流感染死亡危險因素分析
　　目的:目前關于合并血流感染的肝移植受者的死亡危險因素的研究非常缺乏。本研究回顧性分析2002年1月至2012年1月間合并有血流感染的肝移植受者的死亡危險因素。
　　方法:本回顧性研究期間，我院共實施135例肝移植，其中43例受者發(fā)生了77次血流感染。本研究使用單變量分析和多元邏輯回歸以確定

11、合并血流感染的肝移植的死亡危險因素。
　　結(jié)果:43例受者發(fā)生了血流感染(31.9％)。入選受者平均年齡45.1(45.1±14.1)歲。絕大多數(shù)為院內(nèi)獲得性感染(97.7％)，超過半數(shù)的感染為復數(shù)菌感染(53.5％)，24例發(fā)生死亡(55.8％)。單變量分析顯示肝移植后血流感染相關死亡的危險因素為:腹腔內(nèi)/膽道來源(P=0.011)，復數(shù)菌感染(P=0.029)，血小板計數(shù)＜50，000/mm3(P=0.02)，血肌酐值＞1.5

12、mg/dL(P=0.008)，感染性休克(P＜0.001)。多元邏輯回歸分析顯示血肌酐值＞1.5mg/dL和感染性休克是肝移植后血流感染相關死亡的獨立危險因素。
　　結(jié)論:與肝移植合并血流感染的死亡率顯著相關的危險因素包括升高的血清肌酐值及感染性休克。因此有效預防肝移植受者血流感染的發(fā)生以及保護腎功能均十分重要。
　　第四章21例肝或腎移植術后血流感染病原菌分布及耐藥性
　　目的:分析病原菌在肝或腎移植術后發(fā)生的血流感

13、染中的分布情況及其耐藥性特征，以期指導臨床對抗生素進行合理使用。
　　方法:分析本院在2008年1月至2010年4月間的21例進行肝或腎移植術并術后發(fā)生血流感染的受者，21例血流感染的受者中共檢出菌株24株，使用BD微生物鑒定系統(tǒng)進行藥敏試驗以了解病原菌分布及其耐藥性。
　　結(jié)果:病原菌構成中包括占62.5％的G-桿菌及占37.5％的G+球菌。G-桿菌最敏感藥物為喹諾酮（如環(huán)丙沙星）及碳青霉烯類（如美羅培南）抗生素?；前奉惣?/p>

14、單環(huán)β內(nèi)酰胺類（如氨曲南）抗生素耐藥性最高，頭孢類第一、二、三代抗生素（如頭孢他啶）為其次;G+球菌最敏感藥物的為糖肽類（如萬古霉素）及惡唑烷酮類（如利奈唑胺）抗生素。
　　結(jié)論:本院2008年1月至2010年4月間肝或腎移植術后發(fā)生的血流感染中的病原菌以G-桿菌占優(yōu)勢，病原菌普遍對臨床常用抗生素有較高的耐藥性。
　　第二部分腎移植術后感染基因多態(tài)性研究
　　第一章Ik-1家族基因多態(tài)性與腎移植后血流感染相關性

15、　　目的:血流感染在腎移植術后發(fā)病率及死亡率均高，目前暫無研究對IL-1家族基因多態(tài)性與腎移植術后血流感染發(fā)生敏感性的相關性進行調(diào)查。當前的研究因此對此進行調(diào)查以了解IL-1β(-511 C/T)與IL-1受體拮抗劑（86bp可變數(shù)量串聯(lián)重復）基因多態(tài)性與腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生的血流感染的相關性。
　　方法:選取21例術后一年內(nèi)發(fā)生血流感染的腎移植受者作為調(diào)查對象及60例術后未發(fā)生感染的腎移植受者進行對照，自該81例腎移植受者的外周

16、血白細胞以血液基因小量提取試劑盒提取全基因組DNA備用。包含AvaI酶切位點的區(qū)域通過PCR方法被擴增，該酶切位點位于IL-1β基因的-511位點處，擴增產(chǎn)物接著被限制性內(nèi)切酶AvaI消化。包含IL-1受體拮抗劑基因的86堿基對可變數(shù)量串聯(lián)重復多態(tài)區(qū)域也通過PCR方法進行擴增。
　　結(jié)果:本研究發(fā)現(xiàn)單因素分析顯示IL-1β-511CC基因型及IL-1β-511C等位基因在腎移植術后發(fā)生血流感染的受者中具有更高攜帶率(P值分別為0.

17、023和0.015)，未發(fā)現(xiàn)IL-1受體拮抗劑基因型和等位基因與腎移植術后血流感染的相關性(P值分別為0.508和0.507);多因素分析表明，進行混雜因素調(diào)整后，IL-1β-511CC基因型(OR=4.400，95％CI=1.517-12.759， P=0.006)及IL-1β-511C等位基因(OR=2.444，95％CI=1.172-5.100，P=0.015)能夠作為腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生血流感染的獨立危險因素。
　　結(jié)論:

18、本研究提供了腎移植受者IL-1β-511CC基因型及IL-1β-511C的等位基因與腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生血流感染具有相關性的證據(jù)，該研究結(jié)果提示基因型數(shù)據(jù)有助于提供更為精確預測血流感染發(fā)生的可能并有助于采取更好的保護血流感染易感者的策略。
　　第二章TNFβ、IL-10和IL-1家族基因多態(tài)性與腎移植后肺部感染相關性
　　目的:腎移植術后肺部感染發(fā)病率及死亡率均較高，本研究因此對于TNFβ、IL-10、IL-1β和IL-1受

19、體拮抗劑基因多態(tài)性能否預測腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生肺部感染進行調(diào)查。
　　方法:受試者由33位腎移植術后發(fā)生肺部感染的受者及63位腎移植術后未發(fā)生感染的受者組成。96位受者的全基因組DNA自外周血白細胞中提取，包含NcoI、RsaI和AvaI多態(tài)性位點的區(qū)域通過PCR的方法擴增，該三個位點分別位于TNFβ基因的+252位點、IL-10基因的-592位點以及IL-1β基因-511位點處，擴增產(chǎn)物分別被限制性內(nèi)切酶NcoI、RsaI和Av

20、aI消化，包含IL-1受體拮抗劑基因的86堿基對可變數(shù)量串聯(lián)重復多態(tài)區(qū)域通過PCR方法擴增。
　　結(jié)果:單因素分析發(fā)現(xiàn)受體IL-10， IL-1β和IL-1受體拮抗劑基因多態(tài)性與腎移植術后發(fā)生肺部感染無關(P值分別為0.589，0.940和0.286);然而與GG基因型相比較，受者TNFβ+252AA+AG基因型與腎移植術后肺部感染的發(fā)生顯著相關(P=0.006)。進行多因素分析，經(jīng)排除年齡因素影響，受者TNFβ+252AA+AG

21、基因型能夠成為獨立預測腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生肺部感染的獨立危險因素(OR=5.366，95％ CI=1.470-19.589,P=0.011)。
　　結(jié)論:本研究提示受者TNFβ基因多態(tài)性可能成為肺部感染的獨立危險因素，因此能夠明確哪些受者能夠從減少免疫抑制劑并加強預防感染的措施中受益。
　　第三章甘露糖結(jié)合凝集素-2基因多態(tài)性影響腎移植后血流感染發(fā)生
　　目的:甘露糖結(jié)合凝集素屬于C型凝集素，主要依靠結(jié)合多種微生物表面

22、的碳水化合物結(jié)構發(fā)揮作用。甘露糖結(jié)合凝集素-2基因在啟動子區(qū)及外顯子1區(qū)的基因多態(tài)性與甘露糖結(jié)合凝集素血清濃度降低有關，因之與移植術后的感染發(fā)生相關。本研究對甘露糖結(jié)合凝集素-2的基因型變異體與腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生的血流感染的相關性進行分析。
　　方法:前瞻性研究分析81例腎移植術后受者。對血流感染事件進行前瞻性收集。共對6個甘露糖結(jié)合凝集素-2基因的功能性單核苷酸變異點通過基因測序方法進行分析。
　　結(jié)果:多因素分析僅僅發(fā)

23、現(xiàn)當與PP基因型進行比較時，受者甘露糖結(jié)合凝集素-2基因的5'非翻譯區(qū)QQ+PQ基因型與血流感染的發(fā)生相關(OR=3.677，95％可信區(qū)間(CI)=1.127-11.998， P=0.031)，沒有發(fā)現(xiàn)甘露糖結(jié)合凝集素-2基因的其他5個單核苷酸變異與腎移植術后血流感染的發(fā)生相關。
　　結(jié)論:受者甘露糖結(jié)合凝集素-2基因的5'非翻譯區(qū)QQ+PQ基因型與腎移植術后的血流感染的發(fā)生相關。
　　第四章纖維膠凝蛋白-2基因多態(tài)性預測

24、腎移植后血流感染
　　目的:纖維膠凝蛋白-2的結(jié)構和功能與甘露糖結(jié)合凝集素相似，能與微生物表面的N-乙酰氨基葡糖相互作用，纖維膠凝蛋白-2啟動子區(qū)及外顯子8區(qū)基因多態(tài)性與血清中纖維膠凝蛋白-2濃度差異相關，并與移植術后感染相關。本研究結(jié)合其他影響因素評價纖維膠凝蛋白-2基因多態(tài)性與腎移植術后發(fā)生血流感染的相關性。
　　方法:前瞻性研究分析81例腎移植術后受者。共對5個纖維膠凝蛋白-2基因的功能性單核苷酸變異點通過PCR方法擴

25、增后進行基因測序分析。血流感染事件進行前瞻性收集。對纖維膠凝蛋白-2的變異體與腎移植術后一年內(nèi)發(fā)生的血流感染的相關性進行分析。
　　結(jié)果:單因素分析發(fā)現(xiàn)纖維膠凝蛋白-2基因的啟動子區(qū)-986 G/A位點變異體及外顯子8區(qū)Thr236Met(+6359 C＞T)變異體與血流感染的發(fā)生率增高相關(P值均為0.016)。多因素分析僅發(fā)現(xiàn)外顯子8區(qū)Thr236Met(+6359 C＞T)變異體與血流感染的高發(fā)生率相關(OR=4.917，9