蟾酥注射液逆轉(zhuǎn)HL60-ADM多藥耐藥的實驗研究.pdf

1、目的：蟾酥系我國傳統(tǒng)中藥材，從中華大蟾蜍(Bitfo gargarizans cantor)或黑眶蟾蜍(B.melanostictus Schneider)耳后腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經(jīng)現(xiàn)代工藝加工而成的固體，具有抗腫瘤、抗輻射、抗炎、增強免疫力及表面麻醉等藥理作用。蟾酥注射液(Chansu Injection，CHS)是現(xiàn)代科技制藥技術(shù)精制的滅菌水溶性總成分注射液<'[1]>，對治療胃癌、肝癌、乳腺癌和前列腺癌等有一定療效<'[2、

2、3]>。已有大量實驗研究證實蟾酥類中藥制劑在抗腫瘤治療中有較好的發(fā)展前景。本課題旨在探討蟾酥注射液逆轉(zhuǎn)耐阿霉素的急性髓性白血病細(xì)胞(HL60/ADM)多藥耐藥的作用及機理，為逆轉(zhuǎn)腫瘤MDR的新藥開發(fā)及臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法：以加入可逆轉(zhuǎn)濃度的蟾酥注射液培養(yǎng)3天，停藥7天處理的HL60/ADM細(xì)胞為研究對象。采用MTT法檢測阿霉素對蟾酥注射液作用后細(xì)胞的抑制率，高效液相色譜法(HPLC)檢測培養(yǎng)液和細(xì)胞內(nèi)藥物(ADM)濃度的

3、改變，經(jīng)FCM分析細(xì)胞周期的變化，RT-PCR檢測MRP mRNA表達變化，免疫組化法觀察細(xì)胞NF-κB、MRP、GST-π、iNOS蛋白的表達。 結(jié)果：阿霉素對蟾酥注射液作用后的HL60/ADM的抑制作用有明顯增加；FCM結(jié)果顯示蟾酥注射液作用后的HL60/ADM細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期、G2/M期，降低進入S期比例，并出現(xiàn)凋亡峰；HPLC檢測蟾酥注射液處理后明顯增加細(xì)胞內(nèi)ADM的濃度；RT-PCR檢測蟾酥注射液作用后的HL