大鼠動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)CD105的表達(dá)及瑞舒伐他汀干預(yù)后對斑塊穩(wěn)定性的影響.pdf

1、目的:
　　本研究采用SD(Sprague dawley)雄性大鼠建立動脈硬化樣模型，并予瑞舒伐他藥物干預(yù)治療，通過HE染色、免疫組化的蛋白定量、熒光定量PCR-mRNA檢測等方法，觀察動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)CD105表達(dá)變化，初步研究CD105對動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的作用，并探討瑞舒伐他汀干預(yù)后對斑塊穩(wěn)定性的影響。
　　方法:
　　1.建立動物模型:選擇36只周齡為5-7周，體重為180±20mg的健康清潔級的SD雄性

2、大鼠，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后，將大鼠采用隨機(jī)抽簽法分為兩組，分別為:對照組(N=12)和實驗組(N=24)，實驗組予肌注維生素D3+尼古丁灌胃基礎(chǔ)上予高脂飲食，第4周后實驗組隨機(jī)抽簽法分為模型組和藥物干預(yù)組。
　　2.藥物干預(yù)組是使用瑞舒伐他汀鈣片灌胃給藥，每只大鼠按5mg/kg劑量計算，稀釋于1ml生理鹽水灌胃，每天一次，對照組與模型組同時予同等劑量的生理鹽水灌胃。
　　3.第8周末處死所有實驗的大鼠，取出大鼠的胸主動脈

3、血管作HE染色，光鏡下觀察大鼠胸主動脈血管病理形態(tài)學(xué)特點。應(yīng)用CD105抗體對實驗動物血管進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，以明確斑塊局部CD105蛋白表達(dá)情況，應(yīng)用熒光定量PCR檢測動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)CD105-mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.SD大鼠總體生長健康良好，所有36只大鼠全部完成實驗。所得36只大鼠數(shù)據(jù)參與分析，對照組12只，模型組12只，藥物干預(yù)組12只。
　　2.病理形態(tài)觀察
　　取大鼠胸主動脈作H

4、E染色的結(jié)果顯示:大鼠的胸主動脈管壁在對照組表現(xiàn)為管壁各層結(jié)構(gòu)正常，內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細(xì)胞排列整齊并完整，內(nèi)彈力層清晰完整，中膜可見平滑肌細(xì)胞排列整齊、形態(tài)規(guī)則及彈力纖維正常，無明顯的斑塊形成;模型組大鼠胸主動脈內(nèi)膜可見明顯增厚，內(nèi)膜下可見大量的平滑肌細(xì)胞增生，脂質(zhì)斑塊彌漫，可見大量的泡沫細(xì)胞聚集，并可見典型的不穩(wěn)定斑塊，主要表現(xiàn)為薄纖維帽，較大脂質(zhì)核心，大量炎癥細(xì)胞浸潤。藥物干預(yù)組大鼠胸主動脈可見典型的穩(wěn)定斑塊。斑塊表現(xiàn)為較厚的纖維帽，纖

5、維帽完整，脂質(zhì)核心較小，脂質(zhì)核心內(nèi)可見少量的平滑肌細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤。
　　3.免疫組織化學(xué)蛋白定量的結(jié)果
　　免疫組織化學(xué)檢測結(jié)果顯示，CD105在大鼠胸主動脈均可見有表達(dá)，在模型組斑塊內(nèi)可見CD105高表達(dá)，而藥物干預(yù)組斑塊內(nèi)CD105表達(dá)量較模型組減弱，在對照組大鼠胸主動脈可見CD105散在表達(dá)，表達(dá)量較少。本研究最后對結(jié)果進(jìn)行了定量分析，我們觀察到了模型組CD105表達(dá)與對照組比較有顯著差異性(P＜0.05)，模型組

6、CD105與藥物干預(yù)組比較有顯著差異性(P＜0.05)，藥物干預(yù)組與對照組比較有顯著的差異性(P＜0.05)。
　　4.熒光定量PCR結(jié)果
　　CD105-mRNA在各組均檢測到有表達(dá)，各組CD105-mRNA表達(dá)均有顯著差異的差異性(P＜0.05)，表現(xiàn)為對照組胸主動脈局部CD105-mRNA表達(dá)量最低，模型組CD105-mRNA表達(dá)量最高，藥物干預(yù)組CD105-mRNA表達(dá)含量介于對照組與模型組之間。
　　結(jié)論:<