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文檔簡介
1、本文主要從以下幾方面展開論述:
第一部分 THSG對血小板功能的影響
背景和目的:
何首烏作為中華民族傳統(tǒng)的中草藥,生首烏具有解毒(截瘧)、潤腸通便、消癰的作用;制首烏具有補(bǔ)益精血、烏須發(fā)、強(qiáng)筋骨、補(bǔ)肝腎的功效?!堕_寶本草》記載何首烏“入血分,止心痛,益血氣”。THSG是從中國傳統(tǒng)中藥何首烏的根莖中提取的一種水溶性成分,具有抗氧化和抗炎等功效。我們通過不同的實驗方法研究THSG對血小板聚集、顆粒釋放和擴(kuò)展等
2、功能的影響,旨在探索THSG的對血小板功能的影響。本研究為THSG對血小板作用的藥物研發(fā)提供實驗依據(jù)。
方法:
1.使用血小板聚集檢測儀觀察THSG對collagen(2μg/mL),凝血酶(0.04U/mL),U46619(3μM)及ADP(2μM)誘導(dǎo)的血小板聚集的影響。
2.使用血小板聚集檢測儀觀察THSG對collagen(2μg/mL)誘導(dǎo)的血小板ATP釋放的影響。
3.使用流式細(xì)胞儀觀
3、察THSG對血小板P-selectin表達(dá)和PAC-1 binding的影響。
4.使用熒光顯微鏡觀察THSG對人血小板在固化纖維蛋白原上的擴(kuò)展的影響。
結(jié)果:
1. THSG對由collagen誘導(dǎo)的血小板聚集有較強(qiáng)的抑制作用,但對由ADP、U46619和凝血酶誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)的血小板聚集沒有影響。
2.THSG對由collagen誘導(dǎo)的血小板ATP顆粒釋放有較強(qiáng)的抑制作用。
3.THSG對
4、血小板P-選擇素表達(dá)率和PAC-1binding有較強(qiáng)的抑制作用。
4.THSG對血小板在固化的纖維蛋白原上的擴(kuò)展有很強(qiáng)的抑制作用。
結(jié)論:THSG具有較強(qiáng)的抗血小板活性。
第二部分 THSG對血小板功能影響的機(jī)制研究
目的:
研究THSG對血小板功能影響的機(jī)制
方法:
用纖維蛋白原誘導(dǎo)血小板擴(kuò)展,采用Western blot技術(shù)檢測FcγRIIa,Akt(Ser47
5、3),GSK3β(Ser9),Src(Tyr416)和p38 MAPK磷酸化表達(dá),檢測給予THSG干預(yù)后相關(guān)蛋白分子磷酸化表達(dá)的變化。
結(jié)果:
THSG(50umol/L)能較明顯的抑制FcγRIIa,Akt(Ser473)和GSK3β(Ser9)磷酸化,但對Src(Tyr416)和p38MAPK的磷酸化沒有影響。
結(jié)論:
THSG可能通過抑制FcγRIIa/Akt/GSK3β的磷酸化而發(fā)揮抑制血
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