LOH12CR1互作蛋白PSME1的鑒定.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:LOH12CR1是由本課題組在2008年篩選到的LKB1羧基端互作蛋白，LOH12CR1位于12號染色體短臂雜合子缺失區(qū)域，進(jìn)化上高度保守，編碼的蛋白亞細(xì)胞定位于胞漿和少量細(xì)胞核內(nèi)，但其具體作用機制尚不明確。PSME1是2011年本課題組初步篩選出LOH12CR1的互作蛋白，其主要功能是增加20S蛋白酶體的蛋白降解活性和參與主要組織相容性復(fù)合體aI(MHC-Ⅰ)類分子限制性抗原提呈。本研究將驗證LOH12CR1與PSME1是否存在

2、真正的蛋白質(zhì)互作關(guān)系，為LOH12CR1的功能研究提供新的方向。
　　 方法:本研究將構(gòu)建的pCDNA3.1-myc-LOH12CR1和pCMV-tag2B-PSME1重組質(zhì)粒共同轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞，通過免疫共沉淀技術(shù)驗證LOH12CR1與PSME1的蛋白互作關(guān)系。通過免疫熒光實驗和激光共聚焦檢測驗證LOH12CR1與PSME1亞細(xì)胞定位情況。
　　 結(jié)果:經(jīng)免疫共沉淀技術(shù)證實PSME1是LOH12CR1的互作蛋白。

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