阿托伐他汀逆轉(zhuǎn)自發(fā)性高血壓大鼠左室重塑的效應(yīng)及其機(jī)制.pdf

1、研究背景越來越多的證據(jù)表明，他汀類藥物除了能夠有效降低血脂水平外，還能發(fā)揮其降脂以外的多向心血管保護(hù)效應(yīng)，如：改善血管內(nèi)皮功能、穩(wěn)定動脈粥樣硬化斑塊、防止血栓形成以及阻止心室肥厚、改善心室重塑等。原發(fā)性高血壓作為一種遺傳性疾病，其病理生理過程常常伴有左室壁的增厚、室腔的擴(kuò)大以及間質(zhì)的纖維化，這一適應(yīng)性的改變即所謂的“心室重塑”，其發(fā)生除了血壓本身的影響外，在分子水平上，還與細(xì)胞間增殖與凋亡的失衡、細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度的變化、心肌間質(zhì)膠原蛋

2、白的過量沉積以及血管活性物質(zhì)分泌的失調(diào)有關(guān)。近年來，關(guān)于他汀在改善心肌肥厚中的作用及其可能的機(jī)制愈來愈被人們所關(guān)注，我們以往的研究也顯示了他汀在逆轉(zhuǎn)自發(fā)性高血壓大鼠(SpontaneouslyHypertensiveRats，SHR)主動脈血管重塑中的有利效應(yīng)，而對其具體的機(jī)制尚不十分清楚。 目的 本研究以自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?、阿托伐他汀為處理因素，觀察阿托伐他汀對SHR左室重塑的效應(yīng)并探討其可能存在的機(jī)

3、制。 方法 12只8周齡大小的雄性SHR隨機(jī)分為蒸餾水飼養(yǎng)組(SHR-DW組，n=6)與阿托伐他汀治療組(SHR-ATV組，n=6)，并以6只同周齡同性別的正常血壓大(Wistar-Kyotorats，WKY)作為對照(WKY組，n=6)。采用尾動脈容積法每兩周測量一次大鼠血壓，10周后，處死大鼠，取血、收集心臟組織。分別采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TdT-mediateddUTP-biotinnick

4、endlabeling，TUNEL)與免疫組化法檢測左室心肌細(xì)胞的凋亡及p27蛋白的表達(dá)；RT-PCR與WesternBlot法檢測心肌組織中HMG-CoA還原酶(3-hydroxy-3-methylglutarylcoenzymeAreductase，HMG-CoAreductase,HMGR)、法呢醇焦磷酸合成酶(farnesyldiphosphatesynthase，F(xiàn)DS)、法呢醇轉(zhuǎn)化酶(farnesyltransferase，

5、FT)以及心肌肌漿網(wǎng)Ca2+-ATP酶(sarcoendoplasmicreticulumCa2+ATPase，SERCA)、磷酸受納蛋白(phospholamban，PLB)的mRNA及蛋白表達(dá)水平；比色法測定心肌組織羥脯氨酸與膠原蛋白的含量；放射免疫法與亞硝酸鹽還原法測定血漿ET-1的濃度及血清NO的含量。同時計算心臟重與體重比、左室重與體重比、測量心肌細(xì)胞的橫徑，以此作為心肌肥厚的指標(biāo)，并檢測血脂的水平。 結(jié)果 在

6、實(shí)驗(yàn)觀察期間，我們發(fā)現(xiàn)： (一)予蒸餾水灌胃的SHR與WKY相比較： (1)SHR-DW組大鼠血脂的各項(xiàng)指標(biāo)：TC、TG、LDL-C以及HDL-C的水平均明顯降低。 (2)收縮壓水平在SHR-DW組大鼠逐周上升，而在WKY組大鼠沒有顯著變化。 (3)SHR-DW組大鼠的心臟重與體重比、左室重與體重比以及心肌細(xì)胞的橫徑與WKY組大鼠相比，均顯著增加，表現(xiàn)出明顯的心肌肥厚。同時，其心肌組織羥脯氨酸與膠原蛋白的

7、含量也較WKY組大鼠明顯升高。 (4)心肌細(xì)胞的凋亡率及p27蛋白的陽性表達(dá)率在SHR-DW組大鼠中均明顯降低，與WKY組大鼠相比有顯著性差異。 (5)SHR-DW組大鼠心肌組織中HMGR、FDS以及FT的mRNA與蛋白表達(dá)水平與WKY組大鼠相比，均明顯上升；其心肌組織SERCA的mRNA與蛋白水平，以及心肌肌漿網(wǎng)SERCA的活性較WKY組大鼠明顯下降，而PLB的表達(dá)在兩組大鼠間無顯著差異，致使PLB與SERCA的蛋白表

8、達(dá)比在SHR-DW組顯著升高。 (6)血清NO的含量在SHR-DW組大鼠顯著減少，而血漿ET-1的濃度顯著增加，與WKY組大鼠相比均有顯著性差異。 (二)同期給予阿托伐他汀灌胃的SHR與上述兩組相比較： (1)SHR-ATV組大鼠TC、TG以及LDL-C的水平與SHR-DW組相比，均明顯下降；與WKY組相比下降更為顯著。 (2)SHR-ATV組大鼠的收縮壓水平較同階段的SHR-DW組明顯降低，但仍明顯高于

9、WKY組。 (3)SHR-ATV組大鼠心肌肥厚的指標(biāo)以及心肌組織羥脯氨酸與膠原蛋白的含量明顯降低，幾乎接近WKY組水平；與SHR-DW組相比，有顯著差異。 (4)心肌細(xì)胞的凋亡率及p27蛋白的陽性表達(dá)率在SHR-ATV組大鼠較SHR-DW組明顯回升，且稍高于WKY組大鼠水平，但二者間無顯著性差異。 (5)SHR-ATV組大鼠心肌組織HMGR、FDS以及FT的mRNA與蛋白水平與SHR-DW組組大鼠相比，均明顯下降

10、；心肌組織SERCA的mRNA與蛋白水平，以及心肌肌漿網(wǎng)SERCA的活性較SHR-DW組明顯增高，而PLB的表達(dá)與SHR-DW組及WKY組大鼠相比，無顯著差異。PLB與SERCA的蛋白表達(dá)比因此降低。 (6)SHR-ATV組大鼠血清NO的含量增加、血漿ET-1的濃度降低，與SHR-DW組大鼠相比，有顯著性差異，但均未能恢復(fù)到WKY組大鼠水平，且與WKY組大鼠相比，仍有顯著差異。 結(jié)論 (一)阿托伐他汀不僅有效降低

11、了SHR的血脂水平，還有效阻止了SHR左室重塑的發(fā)生。 (二)促進(jìn)心肌細(xì)胞的凋亡、增加心肌細(xì)胞p27蛋白的表達(dá)、降低心肌組織HMGR、FDS、FT的mRNA及蛋白水平、上調(diào)心肌組織SERCA的mRNA及蛋白表達(dá)、增加心肌肌漿網(wǎng)SERCA的活性以及降低PLB與SERCA的蛋白表達(dá)比，同時增加血清NO的含量、降低血漿ET-l的濃度可能是阿托伐他汀發(fā)揮逆轉(zhuǎn)心室重塑效應(yīng)的潛在機(jī)制。此外，阿托伐他汀阻止SHR大鼠血壓上升的效應(yīng)在其逆轉(zhuǎn)SH