連萸煎劑對自發(fā)性高血壓大鼠血管重塑的干預研究.pdf

1、研究目的：1.運用電生理技術對自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)進行頸動脈血壓測量，為中藥連萸煎劑降壓療效提供依據(jù)。2.運用顯微鏡計算機圖像分析技術對SHR主動脈及腸系膜三級動脈的中膜厚度、管腔直徑進行測量，并計算中膜厚度/管腔直徑，探討連萸煎劑對高血壓血管重塑的干預作用。3.運用免疫組織化學方法檢測SHR主動脈血管壁VEGF、IGF-1、ERK-2的蛋白表達，探討連萸煎劑對SHR血管重塑干預的作用機制。 研究方法：選用13周的SHR2

2、4只，WKY8只。24只SHR隨機分為模型組(Model組)、硝苯地平組(Nif組)和LY組(LY組)，每組共8只，雌雄各半；8只WKY大鼠為正常對照組(WKY組)，雌雄各半。Model組予0.9％生理鹽水，Nif組予硝苯地平溶液，LY組以中藥連萸煎劑濃縮液，均為每天灌胃1次，連續(xù)四周。四周后，動物經(jīng)40 mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后，剪開頸部皮毛，分離肌肉，暴露右頸外動脈，右頸外動脈一端結扎，在距離結扎處3mm剪開一小口，自切口

3、處插入PE50小鞘管，并與BL-820生物機能實驗系統(tǒng)相連，記錄大鼠頸動脈收縮壓(SBP)及舒張壓(DBP)。之后插管進入左心室，同時剪開右心耳形成灌注液的引流通道，自插管注射4％多聚甲醛300ml灌注固定。經(jīng)30min灌注完畢后迅速開胸、腹腔，分別取主動脈6mm、腸系膜三級動脈4mm放入固定液(4％多聚甲醛)20ml中固定24h。而后脫水、透明和石蠟包埋。制成4 μm主動脈切片，后行HE染色。光鏡下觀察主動脈及腸系膜三級動脈形態(tài)學改變

4、，并用數(shù)碼攝像顯微鏡計算機圖像分析系統(tǒng)測量大鼠主動脈及腸系膜三級動脈的中膜厚度、管腔直徑，分別計算其中膜厚度/管腔直徑。運用免疫組織化學方法測定大鼠主動脈血管壁VEGF、IGF-1、ERK-2的蛋白表達。 研究結果： 1.與WKY組比較，Model組頸動脈DBP、SBP升高，分別有極顯著性差異和顯著性差異(P(0.01或P<0.05)。與Model組比較，LY組、Nif組大鼠頸動脈DBP、SBP均降低，有顯著性差異(P<

5、0.05)。 2.WKY組主動脈管壁內(nèi)膜、中膜無增厚，管腔相對較大。Model組主動脈管壁增厚，以中膜增厚為主，管腔較WKY狹窄，中膜平滑肌細胞排列紊亂，中膜平滑肌細胞層數(shù)增多，各彈力纖維層扭曲明顯。與Model比較，Nif組及LY組主動脈管壁內(nèi)膜、中膜厚度變薄，管腔狹窄程度有所緩解。與WKY組比較，Model組、Nif組主動脈血管壁中膜厚度/管腔直徑增高，有極顯著性差異(P<0.01)。與Model組比較，LY組及Nif組主動

6、脈血管壁中膜厚度/管腔直徑均有所降低，有顯著性差異(p<0.05)。 3.WKY組腸系膜三級動脈管壁內(nèi)膜、中膜無增厚，管腔相對較大。Model組腸系膜三級動脈管壁增厚，以中膜增厚為主，管腔較WKY組狹窄。與Model比較，Nif組、LY組腸系膜三級動脈管壁內(nèi)膜、中膜厚度變薄，管腔狹窄程度有所緩解。與WKY比較，Model組、Nif組腸系膜三級動脈管壁中膜厚度/管腔直徑增高，有極顯著性差異(P<0.01)。與Model組比較， N

7、if組及LY組腸系膜三級動脈管壁中膜厚度/管腔直徑均有所降低，分別有顯著差異和極顯著性差異(P

8、.01)。與Model組比較，Nif組、LY組IGF-1蛋白表達下調(diào)，分別有顯著性差異和極顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。 6.與WKY組比較，Model組主動脈ERK-2蛋白表達上調(diào)，有極顯著差異(P<0.01)。與Model組比較，Nif組、LY組主動脈ERK-2蛋白表達下調(diào)，分別有顯著性差異和極顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。 研究結論：中藥連萸煎劑能夠降低SHR血壓；抑制SHR主動脈、腸系膜三