Wnt家族成員在TA2小鼠乳腺癌發(fā)生過程中表達(dá)變化規(guī)律及sunitinib對TA2小鼠乳腺癌治療療效的初步研究.pdf

1、研究目的：
　　 1.收集TA2自發(fā)乳腺癌小鼠，觀察其成瘤特點(diǎn)。
　　 2.探討Wnt家族成員中Wnt1、Wnt10b、Wnt5a及Wnt5b在TA2小鼠乳腺癌發(fā)生過程中表達(dá)變化規(guī)律。
　　 3.在高轉(zhuǎn)移TA2小鼠自發(fā)乳腺癌移植瘤模型中觀察舒尼替尼對TA2小鼠自發(fā)乳腺癌的治療效果。希望為人類三陰乳腺癌臨床治療提供新手段。
　　 研究方法：
　　 1.收集TA2自發(fā)乳腺癌小鼠42只，記錄其詳絀資料，

2、包括出生日期，孕產(chǎn)次數(shù)，見瘤日期，處死并進(jìn)行病理學(xué)鑒定。
　　 2.選取TA2小鼠自發(fā)乳腺癌組織及對側(cè)未發(fā)瘤的乳腺組織（癌前病變），正常乳腺組織，處于孕早、中、晚各個時期TA2小鼠的乳腺組織，及經(jīng)產(chǎn)TA2小鼠的乳腺組織，用real time PCR技術(shù)檢測TA2小鼠乳腺癌發(fā)生過程中Wnt家族成員表達(dá)變化規(guī)律。
　　 3.選擇6周齡的TA2雌鼠，建立高轉(zhuǎn)移TA2小鼠自發(fā)乳腺癌移植瘤模型，待瘤體積達(dá)到0.2cm3，按瘤體體積

3、大小分為兩組，對照組給滅菌的去離子水，實(shí)驗(yàn)組給予抗腫瘤藥物舒尼替尼(sunitinib)，隔天測量瘤體體積，用藥1周后，處死小鼠，收集移植瘤、內(nèi)臟和股骨稱重，4％福爾馬林固定。根據(jù)瘤體積繪制腫瘤生長曲線，IHC檢測給藥組與對照組組織內(nèi)細(xì)胞增殖標(biāo)志物PCNA和血管標(biāo)志物endomucin表達(dá)，觀察抗腫瘤藥物舒尼替尼對腫瘤的影響。
　　 研究結(jié)果：
　　 1.本研究所收集的42只TA2自發(fā)乳腺癌小鼠，均為經(jīng)產(chǎn)鼠。平均見瘤年齡

4、為(336.706±85.05)天。平均分娩次數(shù)(3.767±1.79)次，其中分娩次數(shù)超過3次（包括3次）的荷瘤鼠占71.42％，分娩次數(shù)達(dá)7次為最多者，其平均見瘤年齡僅為251.5天，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于平均見瘤年齡。
　　 2.Real time PCR結(jié)果顯示，妊娠期間，Wnt1相對表達(dá)水平逐漸升高，產(chǎn)后相對表達(dá)水平高于正常;Wnt10b在妊娠早期相對表達(dá)水平升高，中期有所下降，妊娠后期又重新升高，產(chǎn)后有所降低，但仍高于正常水平;W

5、nt5a相對表達(dá)水平在妊娠期逐漸下降，產(chǎn)后低于正常水平。Wnt5b相對表達(dá)水平在妊娠過程中先升高后下降，產(chǎn)后，Wnt5b表達(dá)水平也高于正常。在TA2小鼠乳腺癌生成過程中，Wnt1、Wnt10b、Wnt5a在癌前病變和乳腺癌組織中表達(dá)水平高于正常乳腺組織，而Wnt5b在乳腺癌組織中表達(dá)低于正常乳腺組織。
　　 3.藥物實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組腫瘤生長速度顯著低于對照組;此外，實(shí)驗(yàn)組乳腺癌移植瘤在肺、肝、脾、腎和腹腔轉(zhuǎn)移率顯著低于對照組;

6、癌組織內(nèi)壞死面積較大，PCNA陽性癌細(xì)胞數(shù)目顯著低于對照組;與對照組相比，實(shí)驗(yàn)組MVD降低。
　　 結(jié)論：
　　 1.本研究對42只自發(fā)乳腺癌TA2小鼠資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，妊娠次數(shù)越多，乳腺癌發(fā)生的可能性越大，成瘤時間越短，與前期研究結(jié)果一致。
　　 2.Wnt1、Wnt5a、Wmt10b可能在TA2小鼠乳腺癌發(fā)生過程中起促進(jìn)作用;妊娠期妊娠期雌、孕激素水平升高后，可能通過誘導(dǎo)MMTV轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而促進(jìn)Wnt1和