炙甘草對(duì)哮喘大鼠氣道炎癥及STAT-6信號(hào)通路的影響.pdf

1、目的:本研究基于導(dǎo)師史鎖芳教授臨床配伍運(yùn)用大劑量甘草治療哮喘取得較好療效的基礎(chǔ)，從實(shí)驗(yàn)角度進(jìn)一步驗(yàn)證不同劑量炙甘草對(duì)OVA致大鼠哮喘模型癥狀積分、氣道反應(yīng)性、支氣管病理、血清細(xì)胞因子、肺組織pSTAT-6免疫組化及肺組織STAT-6、commonSTAT-6、STAT-6c RT-PCR表達(dá)的影響。一方面，通過(guò)觀察炙甘草對(duì)哮喘的治療作用，試析炙甘草治療哮喘的作用機(jī)理;另一方面，為導(dǎo)師善于運(yùn)用大劑量甘草治療哮喘提供分子生物學(xué)佐證，也為藉“

2、量效關(guān)系”理論提高平喘療效提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法:清潔級(jí)雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為:空白組（Control group）、哮喘模型組(OVAgroup)、潑尼松組(Prednisone group)、炙甘草低劑量組(Low dose glycyrrhizae decoctiongroup)、炙甘草高劑量組（High dose glycyrrhizae decoction group），每組10只。除空白組外，其余各組通過(guò)腹腔注

3、射OVA、AlO3H3、滅活百日咳桿菌致敏，及OVA霧化誘喘，建立哮喘大鼠模型;空白組給予生理鹽水腹腔注射及蒸餾水霧化作為對(duì)照。建立模型后，各組分別給予相應(yīng)的藥物灌胃。通過(guò)哮喘行為學(xué)評(píng)分評(píng)估模型癥狀，乙酰膽堿霧化誘喘間接評(píng)價(jià)氣道反應(yīng)性，肺組織HE染色觀察病理?yè)p傷程度，ELISA法檢測(cè)血清IgE、IL-13、IFN-γ濃度變化，通過(guò)免疫組化了解肺組織pSTAT-6表達(dá)，RT-PCR檢測(cè)STAT-6、commonSTAT-6、STAT-6c

4、的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:①本實(shí)驗(yàn)采用的方法所建立的大鼠哮喘模型符合哮喘動(dòng)物模型的基本特點(diǎn)，我們認(rèn)為本模型符合要求;②統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)顯示:炙甘草高劑量組能顯著改善哮喘大鼠的癥狀、降低氣道反應(yīng)性，同時(shí)改善支氣管病理?yè)p傷，療效顯著優(yōu)于炙甘草低劑量組及哮喘模型組;③炙甘草高劑量組大鼠血清IgE、IL-13水平較哮喘模型組降低，IFN-γ濃度較哮喘模型組升高均顯示出明顯的差異，炙甘草低劑量組與哮喘模型組比較差異不顯;④免疫組化結(jié)果顯示:炙甘草

5、高劑量組pSTAT-6的表達(dá)與哮喘模型組比較具有顯著的抑制作用，炙甘草低劑量組與哮喘模型組比較則未能顯示出統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;⑤STAT-6不同亞型的RT-PCR結(jié)果顯示:炙甘草高劑量組對(duì)STAT-6的表達(dá)具有顯著的抑制作用，其上調(diào)STAT-6c，下調(diào)STAT-6、common STAT-6的作用較哮喘模型組均有顯著差異，而炙甘草低劑量組對(duì)STAT-6不同亞型的表達(dá)與模型組比較差異不顯。
　　結(jié)論:①炙甘草在高劑量時(shí)具有改善哮喘癥狀、降低

6、氣道反應(yīng)性、減輕哮喘氣道病理?yè)p傷，抑制IgE、IL-13生成，促進(jìn)IFN-γ產(chǎn)生，降低肺組織pSTAT-6表達(dá)，上調(diào)STAT-6c，下調(diào)STAT-6、common STAT-6的作用。②炙甘草治療哮喘的作用與其能調(diào)節(jié)STAT-6的轉(zhuǎn)錄，增強(qiáng)抑制性STAT-6c表達(dá)，抑制STAT-6表達(dá)，降低IgE水平，調(diào)節(jié)Th1/Th2免疫應(yīng)答有關(guān)。③炙甘草自身的性味歸經(jīng)及功效是其治療哮病的基礎(chǔ)，其調(diào)和緩急作用在哮病的綜合治療中發(fā)揮了重要作用。④本研究