抗鰻利斯頓氏菌雞卵黃抗體對致病香魚保護作用的研究.pdf

1、特異性卵黃抗體( S p e c i f i c eggyolk immunoglobulin Y，IgY)是通過特定抗原免疫產(chǎn)蛋雞，從免疫母雞產(chǎn)的雞蛋蛋黃中提取出來的，可用于感染特定病原疾病的預防和治療?？诜u卵黃抗體作為預防和治療微生物感染引起的動物疾病，效果明顯，受到廣泛關(guān)注。本研究利用硫酸銨鹽析法提取抗鰻利斯頓氏菌卵黃抗體，并通過膜透析法進行分離純化。購買的健康香魚分為3組，腹腔注射鰻利斯頓氏菌后，分別灌胃特異性抗鰻利斯頓氏菌卵

2、黃抗體( Anti-L.anguillarum IgY aLIgY)、非特異性卵黃抗體( nonspecific IgY nspIgY)和等量的生理鹽水。實驗結(jié)果表明，灌胃100mg/kg和200mg/kg(灌胃卵黃抗體量/香魚體重)特異性卵黃抗體組香魚的累計存活率分別為50％和80%均高于非特異性卵黃抗體組，香魚存活率分別為10%和15%，生理鹽水對照組的香魚7天后全部死亡；分別于香魚感染鰻利斯頓氏菌不同時間點灌胃200mg/kg特異

3、性卵黃抗體，結(jié)果表明感染后即刻灌胃特異性卵黃抗體香魚存活率最高為80%，在感染7天前和感染1天后灌胃保護效果次之，累計存活率分別為64%和55%。揭示特異性卵黃抗體對感染鰻利斯頓氏菌的香魚具有積極的保護作用，且灌胃時間是特異性卵黃抗體發(fā)揮保護作用的一個關(guān)鍵的影響因素。平板計數(shù)法比較感染香魚即刻灌胃特異性卵黃抗體和非特異性卵黃抗體12h后香魚的血液、肝、脾和頭腎組織中的載菌量，結(jié)果表明特異性卵黃抗體組香魚的血、肝、脾和頭腎中的載菌量顯著低

4、于灌胃非特異性卵黃抗體組，說明特異性卵黃抗體可能通過抑制細菌生長發(fā)揮保護香魚的作用。實時熒光定量 PCR測定香魚感染后即刻灌胃兩種卵黃抗體，24h后各組香魚的肝、脾、頭腎組織中腫瘤壞死因子( T N F-α)，白細胞介素-1β(IL-1β)，轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)，白細胞源趨化因子2(LECT2)的mRNA的表達變化，結(jié)果表明灌胃特異性卵黃抗體組除了肝組織中的LECT2，其余各組織各炎癥因子的表達量均顯著低于非特異卵黃抗體組和感染對

5、照組。表明特異性卵黃抗體可能通過抑制炎癥因子的表達抑制炎癥反應。頭腎巨噬細胞吞噬實驗表明，特異性卵黃抗體處理的巨噬細胞對鰻利斯頓氏菌的吞噬率明顯高于非特異卵黃抗體處理組，說明抗鰻利斯頓氏菌卵黃抗體可以通過增強巨噬細胞吞噬鰻利斯頓氏菌的活力提高染病香魚的抵抗力。以上實驗結(jié)果揭示通過灌胃特異性卵黃抗體對感染鰻利斯頓氏菌的香魚能夠發(fā)揮有效的治療和預防作用，且保護作用機制可能和特異性卵黃抗體的抑菌殺菌作用、增強吞噬細胞吞噬活性以及調(diào)節(jié)炎癥因子的