卵黃抗體對感染敗血癥小鼠的保護(hù)作用.pdf

1、敗血癥是指病原菌通過各種途徑侵入血液，并在血液內(nèi)生長繁殖產(chǎn)生大量毒素，引起嚴(yán)重的全身性感染。目前敗血癥主要通過抗生素進(jìn)行治療，但由于抗生素濫用和抗生素殘留帶來的耐藥性問題已越來越嚴(yán)重。卵黃抗體(Egg Yolk Immunoglobulin，IgY)有高效、安全、不產(chǎn)生耐藥性、無毒副作用等特點(diǎn)廣泛應(yīng)用于各種疾病的防控。卵黃抗體被視為一種最具應(yīng)用前景的抗生素替代品。但卵黃抗體對于非腸道疾病的研究較少，本研究建立小鼠敗血癥模型，探討特異性卵

2、黃抗體對小鼠敗血癥的防治效果。為卵黃抗體對全身性感染疾病的應(yīng)用研究提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，為卵黃抗體作用機(jī)制的研究提供了新的動(dòng)物模型。
　　本研究以滅活的金黃色葡萄球菌免疫蛋雞制備特異性卵黃抗體。采用酶聯(lián)免疫吸附法測定卵黃抗體效價(jià)，結(jié)果顯示抗體最高效價(jià)達(dá)到1∶18000，抗體高效價(jià)(＞1∶14000)可持續(xù)5周。采用水稀釋-兩次鹽析-超濾-冷凍干燥技術(shù)分離純化卵黃抗體，最終獲得抗體純度達(dá)83.4％。體外抑菌實(shí)驗(yàn)表明，特異性卵黃抗體能有效抑

3、制金黃色葡萄球菌的生長，在卵黃抗體濃度為5 mg/ml時(shí)就能起到顯著抑菌效果。免疫熒光結(jié)果表明特異性卵黃抗體能與金黃色葡萄球菌特異性結(jié)合。
　　用金黃色葡萄球菌通過尾靜脈注射建立小鼠敗血癥模型，通過口服或腹腔注射特異性卵黃抗體對敗血癥小鼠進(jìn)行防治，觀察小鼠健康狀體及死亡率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，通過尾靜脈注射4×107 CFU的金黃色葡萄球菌可致小鼠患敗血癥且死亡率為100％，該劑量為小鼠敗血癥最小致死量。對小鼠攻毒前采用口服灌胃特異性卵

4、黃抗體進(jìn)行保護(hù)，攻毒后持續(xù)3天。小鼠出現(xiàn)寒顫、聚堆、豎毛、行動(dòng)遲緩、眼角有膿狀物，不進(jìn)食、不飲水等不良現(xiàn)象，且與對照組相比小鼠死亡率無顯著性變化。而對小鼠攻毒前通過腹腔注射特異性卵黃抗體進(jìn)行保護(hù)，攻毒后持續(xù)3天，實(shí)驗(yàn)組小鼠死亡率為0％，與對照組死亡率100％相比防治效果極顯著(P＜0.01)，采用腹腔注射對小鼠進(jìn)行保護(hù)后小鼠血液中菌數(shù)有顯著降低，小鼠體重減少量與對照組相比顯著降低(P＜0.01)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明腹腔注射特異性卵黃抗體可對敗