2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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1、肝特異性/條件性可調(diào)控性的Cre/LoxP位點(diǎn)特異性重組酶系統(tǒng)轉(zhuǎn)基因小鼠,是研究正常發(fā)育中和肝癌發(fā)病過程中肝細(xì)胞譜系in vivo基因功能的必要前提。就肝細(xì)胞特異性而言,已有以白蛋白啟動(dòng)子或LAP啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)Cre酶基因的肝細(xì)胞特異性剔除小鼠模型,但這類小鼠模型尚無法有效地避免滲漏表達(dá)及發(fā)育相關(guān)基因被敲除引起的胚胎致死等缺點(diǎn)。
  因此,本項(xiàng)目將聯(lián)合運(yùn)用肝特異性啟動(dòng)子LAP控制的tet-off誘導(dǎo)系統(tǒng)在轉(zhuǎn)錄水平及Tamoxifen激

2、活系統(tǒng)對(duì)Cre重組酶活性在蛋白相互作用水平上嘗試建立高效的肝特異性,條件性可調(diào)控Cre-ERT2轉(zhuǎn)基因小鼠。
  為此,我們將前期構(gòu)建好的轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)錄后水平雙重調(diào)控的肝特異性表達(dá)Cre重組酶的載體導(dǎo)入小鼠ES細(xì)胞,得到15只可穩(wěn)定遺傳該基因系統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因小鼠。將此轉(zhuǎn)基因小鼠繁殖,并將其Cre陽性的后代與flox-LacZ(ROSA26)報(bào)告小鼠雜交,通過RT-PCR和LacZ染色的方法檢測(cè)轉(zhuǎn)基因小鼠的Cre重組酶活性的肝特異性、Dox

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