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1、碩士學位論文學校代碼:10023學弓:$2011007007心臟組織特異性表Neuregulin2轉基因小鼠的建立及心臟功能分析所院:姓名:指導教師:導師小組:學科專業(yè):研究方向:完成日期:醫(yī)學實驗動物研究所路迎冬高虹張連峰高虹教授張連峰教授比較醫(yī)學NRG2對心臟結構和功能研究二零一四年四月中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院碩。1二學位論文第一部分心臟組織特異性表達Neuregulin2轉基因小鼠的建立及心臟功能分析摘要目的神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白(Ne
2、uregulins,NRGs)是神經(jīng)系統(tǒng)及心臟等器官中介導細胞與細胞之間相互作用的信號蛋白,屬于表皮生長因子家族成員,參與細胞增殖、分化及細胞形態(tài)的形成。神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白2(Neuregulin2,NRG2)是NRGs家族成員,能夠促進神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育,敲除該基因的小鼠表現(xiàn)為早期生長遲緩,NRG2在心臟中也有表達,但其在心臟發(fā)育尤其是病理刺激時對心臟結構及功能的影響尚未見報道。本文目的是建立心臟組織特異性表達NRG2轉基因小鼠,分析其在正常及
3、壓力負荷刺激時對心臟結構及功能的影響。方法利用分子生物學方法,將人NRG2基因克隆到qMHC啟動子下游,構建NRG2轉基因表達載體,利用顯微注射技術建立NRG2轉基因小鼠,PCR鑒定小鼠的基因型,WesternBlot鑒定NRG2蛋白在心臟中的表達并篩選高表達的轉基因品系,主動脈縮窄術(Transverseaorticconstriction,TAC)制備壓力負荷誘導的心肌肥厚小鼠模型,利用超聲影像分析和病理學觀察小鼠心臟結構和功能改變
4、。結果成功構建了NRG2轉基因表達載體,通過WesternBlot實驗篩選出了心臟組織特異性高表達NRG2轉基因小鼠品系。超聲影像結果分析發(fā)現(xiàn),轉基因小鼠左心室舒張末期后壁厚度(LVPWD)比同窩陰性轉基因小鼠明顯增加,3月齡時可達156%(pO05),經(jīng)壓力負荷刺激后,NRG2轉基因手術小鼠心室壁增厚程度顯著下降,心室腔增大,同時心肌排列紊亂程度和纖維化程度明顯比NTG手術小鼠嚴重。結論本研究成功建立了高表達NRG2的轉基因小鼠,與同
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