過敏性猝死豚鼠IgE含量的死后變化規(guī)律及肥大細(xì)胞脫顆粒的觀察.pdf

1、目的：研究過敏性猝死豚鼠死后在4℃冷藏條件下血清IgE含量隨死后時間變化的規(guī)律，觀察過敏性猝死豚鼠肺組織內(nèi)IgE的免疫表達(dá)隨死后時間變化的規(guī)律，同時用組合染色方法顯示肥大細(xì)胞脫顆粒現(xiàn)象，并探討其在法醫(yī)學(xué)鑒定中的作用和意義，試圖為過敏性猝死的法醫(yī)學(xué)鑒定提供準(zhǔn)確、客觀的指標(biāo)。 方法：豚鼠64只，雌雄不限，體重200g左右，隨機(jī)分為實驗組和對照組，對照組和實驗組又分別分為死后0h組、死后12h組、死后24h組、死后48h組，每組8只豚

2、鼠。實驗組采用多人混合血清注射液致敏豚鼠，建立過敏性休克死亡的動物模型，取豚鼠血清及肺組織。(1)用酶聯(lián)免疫吸附實驗檢測豚鼠血清IgE含量。(2)采用免疫組化ABC法對過敏性猝死豚鼠肺組織IgE進(jìn)行免疫組化染色，用BI2000病理圖像分析系統(tǒng)對組織切片進(jìn)行分析。(3)應(yīng)用俾士麥棕—碘綠—馬汀黃(BB-IG-MY)組合染色法顯示肥大細(xì)胞脫顆?，F(xiàn)象。(4)數(shù)據(jù)的處理，采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件，兩因素方差分析。 結(jié)果：(1)實驗組

3、豚鼠在被抗原再次攻擊后20s左右出現(xiàn)活動減少，1min左右出現(xiàn)休克癥狀，2-5min死亡，死亡率100％。對照組豚鼠均未出現(xiàn)任何癥狀。(2)過敏性猝死豚鼠與對照組豚鼠血清IgE含量相比較，p＜0.001，有統(tǒng)計學(xué)意義，可認(rèn)為過敏性猝死豚鼠血清IgE含量顯著升高；過敏性猝死豚鼠死后0h組、死后12h組、死后24h組、死后48h組血清IgE含量相比較，p＞0.05，無統(tǒng)計學(xué)意義，尚不能認(rèn)為過敏性猝死豚鼠死后在4℃冷藏條件下血清IgE含量在4

4、8小時內(nèi)隨時間延長有明顯的變化。(3)免疫組化染色結(jié)果表明，過敏性猝死豚鼠肺小血管壁及血管周圍均出現(xiàn)淺黃色或棕黃色顆粒，對照組豚鼠上述組織部位無淺黃色或棕黃色顆粒。過敏性猝死豚鼠死后0h組、死后12h組、死后24h組、死后48h組肺組織IgE平均分布密度相比較p＞0.05，說明過敏性猝死豚鼠在4℃冷藏條件下肺組織IgE含量在死后48h內(nèi)無明顯變化。(4)組合染色法結(jié)果表明，肥大細(xì)胞胞質(zhì)顆粒呈棕色，細(xì)胞核成綠色，紅細(xì)胞呈黃色。過敏性猝死豚