肥大細胞浸潤和IgE表達在賁門癌中的意義.pdf

1、背景：
　　賁門癌(Gastric cardia Carcinoma,GCC)是我國潮汕地區(qū)的高發(fā)腫瘤之一。賁門癌大多數(shù)分化程度低,侵襲能力強,預后差,嚴重危害人類健康。探討賁門癌局部機體反應狀況對預防和治療賁門癌有著重要的意義。腫瘤的發(fā)生和發(fā)展與其局部微環(huán)境變化的關(guān)系日益受到研究者的重視。肥大細胞(Mast cell,MC)是腫瘤微環(huán)境中浸潤的細胞之一,傳統(tǒng)觀點認為,肥大細胞是介導機體超敏反應,抵抗微生物和寄生蟲感染的主要效應細

2、胞,近年來的研究證實肥大細胞也參與了腫瘤生長發(fā)展的病理生理過程。免疫球蛋白E(IgE)可特異性結(jié)合并且激活肥大細胞,過去免疫球蛋白被認為是成熟分化B細胞特有的產(chǎn)物,近年來的研究表明多種腫瘤細胞中也有免疫球蛋白的表達。因此明確肥大細胞在賁門癌中浸潤特點和IgE在賁門癌中的表達情況對認識賁門癌的發(fā)生發(fā)展有重要意義。
　　目的：
　　本研究觀察肥大細胞在賁門癌組織、癌旁組織以及非癌正常賁門粘膜中的分布的特點,分析肥大細胞數(shù)量和分布

3、規(guī)律及其與賁門癌的臨床病理特征的相關(guān)性。同時從mRNA和蛋白水平檢測IgE在賁門癌組織以及食管癌EC109細胞系和胃癌SGC7901細胞系中的表達。
　　材料和方法：
　　材料：
　　1.收集2009-2010年汕頭大學醫(yī)學院病理科送檢的賁門癌手術(shù)標本共60例,揭陽胃鏡普查賁門粘膜慢性炎癥標本15例。每一例手術(shù)標本均取了癌組織、癌旁組織以及遠離癌旁的正常粘膜組織。60例癌組織中,男性53例,女性7例。年齡41-78歲,

4、平均年齡為59歲。根據(jù)病理學形態(tài)類別分型:管狀腺癌47例,粘液腺癌9例,腺鱗癌1例,乳頭狀癌1例。管狀腺癌按照分化程度的高低分為:高分化1例,中分化20例,中-低分化9例,低分化19例。
　　2.人食管癌EC109細胞系,人胃癌SGC7901細胞系。
　　方法：
　　1.HE染色
　　觀察賁門癌的組織學類型、分化程度、浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況。
　　2.免疫組織化學染色
　　用肥大細胞特異性標記--

5、抗類胰蛋白酶抗體,觀察MC在賁門癌組織、癌旁組織以及正常賁門粘膜組織中的浸潤數(shù)量和分布特點;用抗IgE重鏈抗體標記IgE,檢測IgE在賁門癌組織中的表達情況。
　　3.免疫熒光染色
　　用抗IgE重鏈抗體檢測食管癌細胞系和胃癌細胞系中IgE的表達情況。
　　4.巢式RT-PCR
　　巢式RT-PCR從mRNA水平檢測新鮮賁門癌組織、食管癌EC109細胞系和胃癌SGC7901細胞系中mRNA的表達。
　　5.

6、圖像分析法
　　應用LeicaIM50圖像采集系統(tǒng)和Image-proPlus6.0圖像分析系統(tǒng)計數(shù)肥大細胞的浸潤數(shù)量,并對IgE染色結(jié)果按信號強度進行強度分級。
　　6.統(tǒng)計分析
　　應用SPSS17.0對統(tǒng)計結(jié)果進行分析,采用單因素方差分析,等級資料非參數(shù)檢驗,Spearman相關(guān)分析。
　　結(jié)果：
　　1.肥大細胞主要分布在癌組織浸潤的前沿,在正常粘膜以及炎癥組織中,肥大細胞主要分布在粘膜層和粘膜下層

7、。肥大細胞在慢性炎癥組織內(nèi)計數(shù)最多,癌旁粘膜組織內(nèi)的肥大細胞計數(shù)高于正常粘膜以及癌組織,癌組織內(nèi)肥大細胞計數(shù)最少。計數(shù)差異有顯著統(tǒng)計學意義(F=60.01,P<0.01)。
　　2.癌組織中肥大細胞活化脫顆粒比例最高(90.85％),細胞體積最大,脫顆粒數(shù)量最多,其次是癌旁區(qū)賁門粘膜(48.84%),正常賁門粘膜內(nèi)肥大細胞活化脫顆粒比例最低(39.46%),不同組別間的差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　3.肥大細胞計數(shù)

8、與癌組織的浸潤深度成負相關(guān)(F=4.77,P<0.05),與性別、年齡、腫瘤大小、組織病理分型及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無明顯相關(guān)性(P>0.05)。
　　4.IgE在賁門癌組織、食管癌EC109細胞系和胃癌SGC7901細胞系內(nèi)有mRNA的轉(zhuǎn)錄和相應蛋白的表達。
　　5.IgE在賁門癌組織內(nèi)表達的信號強度與腫瘤的大小成負相關(guān)(P<0.01),與其他臨床參數(shù)無相關(guān)性(P>0.05)。
　　6.肥大細胞的數(shù)量與IgE的表達強度呈正相關(guān)

9、(F=15.826,P<0.01),即IgE染色強度越強,肥大細胞在癌組織中浸潤的數(shù)量越大。
　　結(jié)論：
　　1.MC分布在正常賁門的粘膜層和粘膜下層,在癌組織中,MC主要分布在癌組織浸潤的前沿,癌間質(zhì)內(nèi)少。癌組織中MC的活化比例高于癌旁粘膜和正常粘膜。
　　2.MC在慢性炎癥粘膜內(nèi)浸潤數(shù)量最多,在癌組織中浸潤數(shù)量最低。癌組織中MC浸潤與癌浸潤深度負相關(guān)。MC分布特征提示可能具有抑制賁門癌發(fā)生發(fā)展的作用。
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