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1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文玉米自交系478葉與根酵母雙雜交文庫的構(gòu)建及評價姓名:崔紅軍申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):作物遺傳育種指導(dǎo)教師:黃玉碧20080501AbstractMaizeisallimportantfeed,industrialrawmaterialsandfoodcropsWitllmolecularbiologyandbreedingtechnologymeansprogressandupdate,moreandmorene
2、wtechnologiesandnewmetheodswereappliedtomaizebreedingandproductionofbasicresearchamongthem,yeasttwohybridsystemisaveryimportantresearchmethodsYeasttwo—hybridsystemistostudyproteinandprotein,proteinandRNA,proteinandsmallm
3、olecules,suchastheinteractionofusefultechnologyThroughtheestablishmentofbackboneinbredlinesofmaizeroots,leaves,thedevelopmentoftheendospermeDNAlibrary,andbuildasuitablebaitvectortoscreeningoneoragroupofproteinswhichinter
4、actionwhichthebaitvectorisofgreatsignificancetostudyofmaizeroots,leavesandendospermofthephysiologicalfunctionsandmacromolecularmaterialresearchfunction,andthesametime,forthebreedingofmaizeprovideatheoreticalbasisForthisr
5、eason,thefollowingtextisdevotedtoeDNAlibraryconstructionThefirstchainofeDNAWaSsynthesizedbyreversetranscriptfrommaizerootsandleavesmRNA舔templatebySMARTmetheodsThedseDNAWaSamplifiedbylongdistancePCRinexistenceofDNApolymer
6、aseThepurifieddseDNAandthelinearizedplasmidpGADT7一Recwereco—transformedintothecompetentyeastAH109RecombinantsplasmidsformedthroughhomologousrecombinationinvivoAllthetransformantswereharvestedfromtheSD/LeuplatesAfterexamn
7、tion。齜libraryconversionofmaizerootsWas176x107transfersbeggar/3ItgpGADT7Rec,thecapacityofthemaizerootslibraryWas117106pfu/mL,thereorganizationrateofthemaizerootslibraryWas95%andtherecombinantfragmentswerelargerthan500bpTh
8、econversionofmaizeleaveslibraryWas154x107transfersbeggar/3I_tgpGADT7Rec,t11ecapacityofthemaizeleaveslibraryWaS103x106pftdmL,thereorganizationrateofthemaizeleaveslibraryWaS95%andtherecombinantfragmentswerelargerthan500bpA
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