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文檔簡介
1、本研究應(yīng)用SSR分子標記技術(shù)對玉米(Zeamays.L.)自交系和雜交種共計41份材料,進行了研究,建立了一套簡便、快捷、準確可靠的分子技術(shù)鑒定體系,構(gòu)建了玉米自交系和雜交種的SSR指紋圖譜數(shù)據(jù)庫,篩選出了一批在玉米自交系和雜交種上具有較高多態(tài)性的SSR引物。通過常規(guī)純度鑒定實驗和實踐應(yīng)用驗證,利用該技術(shù)體系鑒定雜交玉米種子的純度是可行的。主要研究結(jié)果如下: 1.探索出了適合玉米DNA提取,PCR擴增,PAGE電泳、銀染檢測的技
2、術(shù)體系。 2.利用30對分別位于10對染色體上的引物對玉米材料進行了SSR分析。在35份自交系中共檢測出299個等位基因變異,變幅4-19個,平均9.97個;多態(tài)性信息量為0.869-0.108,平均為0.593。 3.根據(jù)SSR指紋圖譜,利用UPGMA法將供試系劃分為5類:分別是Ⅰ,5033、黃C、478、488、改良478、9046、滑986、952433、7922、2433、248、318、黃糯478、黑糯478、
3、C8605、65232、改良65、鄭58-3、改良鄭58、鄭58、8112;Ⅱ,9041;Ⅲ,P138、598、178、137、Ex12、W71-2;Ⅳ,9010、340、鄭22;Ⅴ,昌7-2、H21、Hn淺黃糯、Hn黑糯。劃分結(jié)果與根據(jù)地理來源、種質(zhì)系譜的分類結(jié)果基本一致。 4.從30對SSR引物中,按照其PIC值和染色體上的分布,選取10對核心引物,其帶型穩(wěn)定、清晰,構(gòu)建了數(shù)字化的指紋,能夠較好地區(qū)分35份自交系材料。
4、 5.利用分子標記技術(shù)進行玉米雜交組合純度鑒定是可行的。本研究對6個玉米雜交組合進行了SSR分析,從30對SSR引物中篩選到6對適合玉米雜交種的多態(tài)性好的引物,編號為Umc1002、Bnlg1112、Bnlg238、Umc1153、Phi072、Bnlg240,可分析6個供試玉米雜交種的純度。 6.建立了較系統(tǒng)的純度鑒定體系:種子催芽2-3d,CTAB法提取DNA,篩選的引物進行SSR分析,銀染法檢測指紋圖譜,與標準圖譜比較鑒
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