右美托咪定對(duì)膿毒癥大鼠的保護(hù)作用.pdf

1、目的:
　　應(yīng)用盲腸結(jié)扎穿孔法制作大鼠膿毒癥模型，探討右美托咪定對(duì)大鼠膿毒癥時(shí)期炎癥因子的影響，為臨床預(yù)防和治療膿毒癥提供依據(jù)。
　　方法:
　　由中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物所提供的雄性健康Wistar大鼠140只，鼠齡10~14周，體重240~300g，采用隨機(jī)量表分成4組，每組35只：假手術(shù)組（S組），膿毒癥模型組（CLP組），右美托咪定組（Dex組），右美托咪定+阿替美唑組（D+A組）。S組大鼠在麻醉后只開(kāi)腹分離盲腸，

2、CLP組應(yīng)用盲腸結(jié)扎穿孔法制作大鼠膿毒癥模型。Dex組和D+A組分別在手術(shù)開(kāi)始前1小時(shí)注射右美托咪定30μg/kg，S組和CLP組分給給予等量生理鹽水。D+A組在腹腔注射右美托咪定前向?qū)嶒?yàn)鼠腹腔內(nèi)注射阿替美唑250μg/kg。每組分別于術(shù)后4h、8h、12h、24h、和36h時(shí)隨機(jī)活殺大鼠5只，開(kāi)胸經(jīng)心臟取血5ml，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)血清中 TNFα、IL-6和HMGB1水平的變化，熒光定量聚合酶連反應(yīng)（PCR）

3、檢測(cè)脾臟 HMGB1mRNA的表達(dá)水平；每組剩余的10只大鼠，觀察其5d內(nèi)的死亡率，并繪制出大鼠的生存曲線。文中所制作的CLP模型嚴(yán)格按論文中參考文獻(xiàn)[6]操作過(guò)程制作，通過(guò)觀察，大鼠麻醉蘇醒后，均表現(xiàn)出毛發(fā)乍起、眼中分泌物增多、體溫升高等會(huì)情況，說(shuō)明通過(guò)該種方法制作的膿毒癥模型成功。實(shí)驗(yàn)中排除麻醉未蘇醒即死亡的大鼠。
　　結(jié)果:
　　四組間大鼠的體重比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與 S組比較，CLP組血清中 TNF

4、-α和IL-6水平在4h后均明顯升高（P<0.05）；Dex組同CLP比較，血清中TNF-α和IL-6水平有所降低（P<0.05）；D+A組清中TNF-α和IL-6水平和CLP組相類(lèi)似（P>0.05）。與 S組比較，CLP組血清中 HMGB1和脾臟HMGB1mRNA的表達(dá)水平明顯升高（P<0.05）；Dex組血清中HMGB1和脾臟HMGB1mRNA的表達(dá)水平比CLP組有所降低（P<0.05），D+A組血清中HMGB1和脾臟HMGB1mR

5、NA的表達(dá)水平和CLP組相類(lèi)似（P>0.05）。S組術(shù)后5天內(nèi)無(wú)死亡，Dex組5天內(nèi)的死亡率為30％，CLP組和D+A組大鼠5天內(nèi)的死亡率分別為70%和60%，Dex組術(shù)后5天生存數(shù)量明顯高于CLP組和D+A組（P<0.05）。經(jīng)Pearson直線相關(guān)分析表明，血清HMGB1與脾臟HMGB1 mRNA表達(dá)呈顯著正相關(guān)（r=0.943，P<0.05）。
　　結(jié)論:
　　右美托咪定能夠降低膿毒癥大鼠血清中 TNF-α、IL-6和