EGF在糖尿病足潰瘍創(chuàng)面愈合過程中的作用及其機(jī)制.pdf

1、目的:探討表皮生長因子(EGF)對糖尿病足潰瘍創(chuàng)面愈合的治療效果及其作用機(jī)制。
　　方法:系統(tǒng)抽樣的方法隨機(jī)抽取新西蘭實(shí)驗(yàn)兔70只，被選的實(shí)驗(yàn)兔體重大約在2.5至3.0kg，新西蘭實(shí)驗(yàn)兔的性別不受限制。用高脂高糖的飼料喂養(yǎng)新西蘭實(shí)驗(yàn)兔2個(gè)月。2月后，用生理鹽水依比例配成2.5％四氧嘧啶，試驗(yàn)兔禁食6小時(shí)后向?qū)嶒?yàn)兔耳緣靜脈注射以上配制的糖尿病誘導(dǎo)液，劑量為1次/3天、每次50mg/kg。第10天測空腹血糖＞11.1mmol/L入選模

2、型，共有32只實(shí)驗(yàn)兔符合實(shí)驗(yàn)的納入標(biāo)準(zhǔn)。符合標(biāo)準(zhǔn)的32新西蘭兔隨機(jī)分為兩組:表皮生長因子組（A組）和對照組（B組），兩組都16只。消毒后，在兔子大腿部造創(chuàng)，其標(biāo)準(zhǔn)為:實(shí)驗(yàn)用兔足背部切除10mm×7mm矩形區(qū)域全層皮膚，造創(chuàng)完成后，一組局部創(chuàng)口連續(xù)涂抹表皮生長因子(EGF)，用量從始至終為1ml，每天一次，作為A組;另一組為不施加干預(yù)的B組。實(shí)驗(yàn)過程中，飼養(yǎng)方法及衛(wèi)生水平統(tǒng)一，保證其水槽不干、食槽盈滿、衛(wèi)生干凈整潔，盡可能達(dá)到均衡，減少偏

3、倚。健康健康新西蘭大白兔糖尿病足潰瘍造模后第7和第15天，各新西蘭大白兔糖尿病足潰瘍面用數(shù)碼相機(jī)拍照，即刻記錄創(chuàng)面愈合率及愈合面積。圖像經(jīng)圖像處理軟件Photoshop軟件處理后分析計(jì)算出糖尿病足潰瘍創(chuàng)面愈合率。計(jì)算公式為:創(chuàng)面愈合率=[（原創(chuàng)面面積-未愈合創(chuàng)面面積）/原創(chuàng)面面積）]。15天后，沿超出創(chuàng)面外緣2毫米處取下新愈合的創(chuàng)面肉芽組織并作Masson、HE染色、電鏡觀察及EGFmRNA檢測。所得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Gel-Proanalyz

4、er4.0軟件進(jìn)行灰度分析。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的資料描述采用X±S（均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差）的形式表示，樣本統(tǒng)計(jì)量采用統(tǒng)計(jì)分析軟件SPSS13.0軟件。對照組與實(shí)驗(yàn)組比較前先對樣本資料做正態(tài)分布檢驗(yàn)及方差齊性檢驗(yàn)，符合條件后做成組設(shè)計(jì)兩樣本t檢驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)為雙尾雙側(cè)t檢驗(yàn)，a值取0.05。
　　結(jié)果:(1) Masson、HE染色結(jié)果顯示:與B組比較，A組潰瘍愈合較好，肉芽生長迅速，成纖維細(xì)胞聚集成群，輪廓較清晰;細(xì)胞外基質(zhì)較豐富，膠原纖維束排列

5、密集而有序，可見大量血管生成，組織分層愈合良好。(2)電鏡下:A組成纖維細(xì)胞體積大、形態(tài)完好、胞質(zhì)內(nèi)細(xì)胞器豐富，細(xì)胞周圍可見大量膠原纖維排列整齊有序，B組成纖維細(xì)胞細(xì)胞數(shù)目較少，形態(tài)不規(guī)整，排列混亂無序，成纖維細(xì)胞周圍膠原纖維稀疏、細(xì)胞內(nèi)容物少;(3) EGF的mRNA檢測發(fā)現(xiàn):A組EGFmRNA的相對灰度值和B組EGFmRNA的相對灰度值經(jīng)t檢驗(yàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)，A組內(nèi)源性EGFmRNA表達(dá)增高。
　　結(jié)論:EGF可

6、以誘導(dǎo)角質(zhì)細(xì)胞和纖維母細(xì)胞增生、使角質(zhì)層增厚、刺激周圍神經(jīng)再生[6，7]。EGF不僅參與細(xì)胞增殖、遷移和分化功能的調(diào)節(jié)，而且是有效的促細(xì)胞分離原[1，2]。新西蘭兔糖尿病足潰瘍創(chuàng)面施加外源性EGF后內(nèi)源性EGFmRNA的基因轉(zhuǎn)錄是增高的，試驗(yàn)初步證明外源性表皮生長因子和觀察指標(biāo)內(nèi)源性表皮生長因子mRNA是相關(guān)的?？赡艿脑頌橥庠葱缘谋砥どL因子(EGF)可以促進(jìn)EGFmRNA的轉(zhuǎn)錄和翻譯，EGFmRNA更好的得到基因表達(dá)，從而刺激組織分