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文檔簡介
1、因為對于兔肉的需求逐年增加,常規(guī)的育種技術(shù)對生長性狀和肉質(zhì)性狀的遺傳改良有限,所以尋找其主效基因和遺傳標記對提高肉兔生長和肉品質(zhì)具有重要意義。肌分化抑制因子(MDFI)基因和抑制素2(PHB2)基因是與動物生產(chǎn)性狀有關(guān)的兩個重要基因,為了提高這些性狀,本研究旨在尋找MDFI基因和PHB2基因的SNP位點以輔助分子選擇標記。試驗以青島康大兔業(yè)發(fā)展有限公司和山東農(nóng)業(yè)大學聯(lián)合培育的肉兔7個專門化品系為試驗材料,其中雄兔171只,雌兔168只,
2、共計339只,作為試驗材料進行混池測序,PCR-SSCP單鏈構(gòu)象多態(tài)和限制性內(nèi)切酶酶切分析,根據(jù)兩個基因的基因型頻率計算各群體的基因頻率,并采用SAS軟件最小二乘法分析其對生產(chǎn)性狀的影響。主要結(jié)果如下:
(1)MDFI基因:本研究對肉兔MDFI的調(diào)控區(qū)和全部序列設(shè)計引物后,進行擴增混池測序及PCR-SSCP分析發(fā)現(xiàn)該基因有4個SNPS,G4010A,T5874C,A6400G和C10732T,并且每一個位點都有三種基因型。經(jīng)x
3、2檢驗不同性別群體發(fā)現(xiàn),G4010A,A6400G和C10732T位點的基因型分布達到Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05),而T5874C位點的基因型偏離了Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P<0.05)。
在雄性群體中,MDFI基因G4010A與70天體重、背腰最長肌PH值、系水力、滴水損失、蒸煮損失、水分含量和灰分含量差異顯著(P<0.05),C10732T位點的三種基因型與70天體重、70天體長、70
4、天體尺的差異顯著(P<0.05);在雌性群體中,MDFI基因G4010A與背腰最長肌PH值,T5874C與肌內(nèi)脂肪含量,6400位點與灰分含量、肌內(nèi)脂肪含量具有顯著相關(guān)性(P<0.05)。
(2)PHB2基因:本研究對PHB2基因全部序列進行了擴增混池測序及PCR-SSCP分析發(fā)現(xiàn)該基因四個突變位點A678C、C2653T、A3004G和G3048A。其中A678C位點只有兩種基因型,C2653T、A3004G和G3048A有
5、三種基因型。經(jīng)x2檢驗兩種性別群體發(fā)現(xiàn)所有位點的基因型分布達到偏離了Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P<0.05)。在雄性群體中,PHB2基因A678C位點與肌肉蛋白含量差異顯著(P<0.05),PHB2基因C2653T位點與70天體重、84天體重、水分含量具有顯著相關(guān)性(P<0.05),PHB2基因G3048A位點與70天體重、70天體尺具有顯著相關(guān)性(P<0.05);在雌性群體中,PHB2基因C2653T與30天體重,A300
6、4G與背腰最長肌PH、熟肉率,G3048A與30天體重有顯著相關(guān)性(P<0.05)。
(3)MDFI和PHB2基因不同基因型公兔個體的表達情況,在背腰最長肌,MDFI基因中G4010A,A6400G,C10732T位點三種基因型的RNA表達量差異顯著(P<0.05);在后腿肌,MDFI基因的G4010A位點的三種基因型的RNA表達量差異顯著(P<0.05);在背腰最長肌中,PHB2基因的四個突變位點中,只有C2653T位點的三
7、種基因型RNA表達量差異顯著(P<0.05);在后腿肌中,PHB2基因的所有位點的基因型的RNA表達量差異均不顯著(P>0.05)。
(4)在背腰最長肌中,肉兔的30日齡與60日齡、90日齡、120日齡,120日齡天與60日齡、90日齡、120日齡個體的MDFI的表達量差異顯著(P<0.05)。肉兔的30日齡與60日齡、90天日齡、160日齡,120日齡與60日齡、90天日齡、160日齡之間PHB2基因的表達量存在顯著差異(P
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