茴腦生物催化合成茴香醛及其生物轉化體系分析方法的構建.pdf

1、本文開展茴腦生物降解過程及其生物轉化體系的產物分析方法研究，通過篩選合適微生物菌株，使茴腦選擇性轉化為茴香醛，為今后生物法合成茴香醛提供理論基礎。 取得的主要研究成果如下： (1)確定了薄層層析定性檢測茴腦、茴香醛、茴香酸的方法，分析條件為：展開劑為石油醚∶氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸=25∶10∶3∶0.2(v/v/v/v)，該法能快速檢測三種化合物。 (2)確立高效液相色譜法定量檢測茴腦、茴香醛、茴香酸三元混合體系的

2、色譜條件為：流動相為乙腈/水/冰醋酸(體積比為70∶30∶0.02)，流速為0.8mL·min-1，檢測波長為260 nm，該法能準確定量分析三種化合物。 (3)建立了茴香醛、茴香酸二元體系的紫外分光光度法。利用紫外分光光度法等吸收點確立了茴香醛、茴香酸的定量分析方程分別是p(茴香醛)=A290-0.0064/0.0775，p(茴香酸)=A260-A292/0.0775，該法能簡便快速準確定量分析兩種化合物。 (4)創(chuàng)造

3、性地開展了茴腦生物降解微生物篩選。對八角果、枝和葉，八角樹下土壤、八角中試車間附近土樣及茴油提取廢液進行了茴腦生物轉化生成茴香醛菌株的篩選，篩選到了具有使茴腦很好降解的ZJ-9菌株，初步鑒定ZJ-9菌株為黑曲霉。對菌株ZJ-9的培養(yǎng)條件進行了優(yōu)化，確定了黑曲霉ZJ-9發(fā)酵的最佳接種量為孢子數4.0×105個；最佳發(fā)酵溫度為30℃；500mL的三口瓶里最佳裝液量100mL；搖床轉數為200r·min-1；初始pH值以6.0為最優(yōu)，培養(yǎng)時間