虎杖有效成分的提取分離及其生物轉(zhuǎn)化.pdf

1、本文考察了水煎煮法、乙醇浸提法對虎杖有效成分提取效果的影響，結(jié)果表明乙醇室溫浸提法明顯優(yōu)于水煎煮法。確定乙醇室溫浸提法的工藝條件為：虎杖粉碎物，8倍體積的80﹪乙醇60℃水浴中提取2h，提取次數(shù)為3次，提取率為96.3﹪。 從自然界中篩選出能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生白藜蘆醇苷-β-D-葡萄糖苷酶產(chǎn)生菌，用硫銨沉淀法、DEAE-celluloseDE-52陰離子交換法純化了白藜蘆醇苷-β-D-葡萄糖苷酶。SDS-PAGE測定為電泳單點(diǎn)純，相對分

2、子質(zhì)量是76kDa。 以白藜蘆醇苷為底物進(jìn)行酶性質(zhì)的研究，結(jié)果顯示，白藜蘆醇苷-β-D-葡萄糖苷酶反應(yīng)最適溫度60℃，最適pH5.0；在溫度低于60℃，pH4.0～5.0之間穩(wěn)定；Mg2+對酶活力幾乎沒有影響。Ca2+、Zn2+、Cu2+均對酶反應(yīng)有抑制作用，其中Cu2+對酶活力影響最為顯著。該酶的反應(yīng)動力學(xué)方程為V=0.0194[s]/(0.741+[s])。 酶轉(zhuǎn)化白藜蘆醇苷制備白藜蘆醇的反應(yīng)條件為：溫度40℃，pH