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文檔簡介
1、本論文對發(fā)酵法生產(chǎn)L-絲氨酸進行了研究。研究內(nèi)容主要包括了L-絲氨酸產(chǎn)生菌的選育及其發(fā)酵條件的優(yōu)化。 采用紙層析分光光度計法對發(fā)酵液中L-絲氨酸進行了定性、定量分析,繪制出了L-絲氨酸和甘氨酸的標準曲線,并推導出了通過測定吸光度來計算發(fā)酵液中L-絲氨酸和甘氨酸含量的計算公式。研究發(fā)現(xiàn)該法具有較高的準確度和精密度,并且操作方便、易于掌握,非常適合在L-絲氨酸產(chǎn)生菌篩選中應(yīng)用。 以實驗室保藏微球菌株LJW-01(D-SerR
2、,GlyR,MthR)為出發(fā)菌株,采用DES和NTG誘變,分別以磺胺胍(SG)和高濃度甘氨酸為藥物平板,以蛋氨酸為缺陷型,成功選育出一株絲氨酸產(chǎn)量較高菌株ZC-8(D-SerR,GlyHR,MthR,SGR,Met-),該菌株在未經(jīng)優(yōu)化的條件下發(fā)酵液中可積累L-絲氨酸6.2g/L,比出發(fā)菌株產(chǎn)量提高了一倍多。通過傳代實驗表明,該菌產(chǎn)酸穩(wěn)定,遺傳標記較好的保存,適合發(fā)酵生產(chǎn)L-絲氨酸。 對菌株ZC-8的種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基進行優(yōu)
3、化,確定最優(yōu)種子培養(yǎng)基組成為(g/L):葡萄糖20,玉米漿20,(NH4)2SO420,KH2PO41,MgSO4·7H2O0.2。最佳培養(yǎng)條件:裝液量為40mL/250mL三角瓶,搖瓶轉(zhuǎn)速為100r/min,培養(yǎng)溫度為30℃,pH7.0~7.5,種齡為10h。最優(yōu)發(fā)酵培養(yǎng)基組成為(g/L):甘氨酸35,葡萄糖5,(NH4)2SO422,KH2PO41,MgSO4·7H2O0.8,玉米漿14,CaCO320。發(fā)酵最佳搖瓶培養(yǎng)條件:裝液量
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