重組抗原診斷家畜日本血吸蟲病的比較分析.pdf

1、日本血吸蟲病是危害嚴(yán)重的人畜共患寄生蟲病，患病家畜是我國血吸蟲病最重要的傳染源，家畜血防工作對我國控制和消滅血吸蟲病流行意義重大。準(zhǔn)確的診斷是做好血防工作的前提和基礎(chǔ)?，F(xiàn)有的血吸蟲病病原學(xué)診斷方法檢出率低、漏檢率高、費(fèi)時費(fèi)力，不適應(yīng)血防工作發(fā)展的需要，血清學(xué)診斷方法操作較簡便、方法敏感，但是特異性、重復(fù)性和穩(wěn)定性仍不夠理想。不能用于療效考核，不可區(qū)分現(xiàn)癥感染和既往感染，尋找更為理想的診斷抗原，建立更加特異敏感，或可區(qū)分現(xiàn)癥感染和既往感染

2、、可用于療效考核的血吸蟲病檢測技術(shù)是當(dāng)前血防工作的迫切需要。尋找新的可同時提高診斷方法的特異性和敏感性的基因重組抗原，是本研究嘗試的目的之一。 本研究應(yīng)用基因工程技術(shù)，表達(dá)和純化了本實(shí)驗(yàn)室研制的5種血吸蟲病基因重組抗原或多表位基因重組抗原，同時以目前血吸蟲病血清學(xué)診斷最常用的抗原——血吸蟲蟲卵可溶性抗原SEA作為對照抗原，應(yīng)用間接ELISA法，比較分析不同基因重組抗原或多表位基因重組抗原作為診斷抗原檢測牛、兔血吸蟲病的應(yīng)用潛力。

3、 首先通過方陣實(shí)驗(yàn)，摸索和確定了以上5種血吸蟲基因重組抗原和SEA作為診斷抗原，應(yīng)用間接ELISA法檢測日本血吸蟲實(shí)驗(yàn)感染兔和現(xiàn)場感染牛的優(yōu)選實(shí)驗(yàn)條件，包括抗原、包被濃度、封閉劑及作用時間、血清稀釋度及作用時間、酶標(biāo)二抗稀釋度及作用條件、底物作用條件等，在此基礎(chǔ)上，開展了以下三方面研究：1.比較分析以不同基因重組抗原作為診斷抗原，檢測兔和牛日本血吸蟲病的敏感性和特異性。2.分析比較日本血吸蟲感染兔藥物治療前后基因重組抗原特異性抗

4、體消長情況。3.血吸蟲早期診斷抗原與技術(shù)的研究。 研究結(jié)果表明：以二價多表位重組抗原pGEX-SjGCP-Sj23作為診斷抗原，對牛和兔血吸蟲病的檢出率和對健康動物的陰性符合率都高于SEA和其他幾種基因重組抗原。如用于療效考核或區(qū)分現(xiàn)癥感染和既往感染目的，在所測試的幾種抗原中，以二價多表位重組抗原pGEX-SjGCP-Sj23效果最佳。建立針對pGEX-SjGCP-Sj23的特異性IgM抗體的檢測技術(shù)有可能用于血吸蟲病的早期診斷